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1、中圖分類號(hào)&Z!!UDC61O碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q三三密級(jí)公玨RNA干擾抑制HMGBl基因表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖作用的研究EffectonProliferationofHumanEndometrialCancerCellbyRNAiInhibitingHMGB1GeneExpression作者姓名:學(xué)科專業(yè):研究方向:學(xué)院(系、所):指導(dǎo)教師:吳然然臨床醫(yī)學(xué)婦產(chǎn)科學(xué)湘雅醫(yī)院吳佳捷教授論文答辯日期丕!生:篁:簽答辯委員會(huì)主席中南大學(xué)
2、二O一四年五月~蛩奉摘要RNA干擾抑制HMGBl基因表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖作用的研究摘要目的:通過RNA干擾抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中高遷移率族蛋白1(Highmobilitygroupbox1,HMGBl)的表達(dá),研究HMGBl對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖及細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡的影響,并探討其分子機(jī)制。方法:構(gòu)建靶向HMGBl基因的慢病毒shRNA載體,轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC1A,同時(shí)利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法(RealtimePCR)和
3、免疫印跡法(WesternBlot)檢測(cè)轉(zhuǎn)染HMGBlsiRNA后細(xì)胞刪GBlrnJⅢA和蛋白表達(dá)水平的變化。MTT法和流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染HMGBlsiRNA后HEC1A細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的變化。WesternBlot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染HMGBl一siRNA后細(xì)胞AKT、pAKT和CyclinDl蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:1、子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC1A轉(zhuǎn)染慢病毒重組質(zhì)粒后,熒光顯微鏡下可見細(xì)胞表達(dá)較強(qiáng)的熒光信號(hào),轉(zhuǎn)染效率達(dá)80%左右,
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