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文檔簡介
1、目的:
觀察小干擾RNA(small interferenceRNA,siRNA)沉默過氧化物酶體增殖物激活受體輔激活因子1α(PGC-1α)基因表達(dá)對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-1A的生長及凋亡的影響。
方法:
利用化學(xué)合成siRNA轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-1A,靶向抑制PGC-1α表達(dá),同時設(shè)置轉(zhuǎn)染無意義siRNA片段的陰性對照組(NC組)及未做處理的空白對照組。采用Real-timePCR法檢測PGA-1
2、αSiRNA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞、NC組細(xì)胞及正常細(xì)胞PGC-1αmRNA表達(dá)水平。MTS法繪制細(xì)胞生長曲線,檢測細(xì)胞增殖。AnnexinⅤ/PI流式細(xì)胞分析法檢測各組細(xì)胞凋亡率。
結(jié)果:
(1)Real-timePCR定量檢測PGC-1α,PGC-1αsiRNA組相對空白對照組及NC組的PGC-1α表達(dá)量明顯減少;
(2)MTS實驗結(jié)果顯示各時段PGA-1αSiRNA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞490mm處吸光度值(OD值)均低于相
3、同時段空白對照組及NC組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與空白對照組及NC組相比,PGA-1αSiRNA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖曲線低平,表明其增殖程度明顯減低;
(3)流式細(xì)胞儀檢測顯示細(xì)胞凋亡率在空白對照組、NC組及PGA-1αSiRNA轉(zhuǎn)染組中分別為18.6%、21.6%和28.9%,PGA-1αSiRNA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞與NC組及空白對照組細(xì)胞相比凋亡明顯。
結(jié)論:
根據(jù)本實驗結(jié)果PGC-1α表達(dá)減低可明顯抑制
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