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文檔簡介
1、目的:
研究蘆薈大黃素(Aloe emodin)對人子宮內(nèi)膜癌(HEC-1-B)細(xì)胞體外增殖、細(xì)胞周期和凋亡的影響,深入探討蘆薈大黃素對HEC-1-B細(xì)胞干擾的作用機(jī)制。
方法:
將體外培養(yǎng)的HEC-1-B采用隨機(jī)“數(shù)字表”隨機(jī)分成5組:對照組、蘆薈大黃素Ⅰ、蘆薈大黃素Ⅱ、蘆薈大黃素Ⅲ、蘆薈大黃素Ⅳ。在外在條件相同的基礎(chǔ)下,分別給予不同濃度的蘆薈大黃素(0、20、40、80、160)μmol/L培養(yǎng)48h[
2、1]。采用MTT法和Western blot法測定蘆薈大黃素增殖效應(yīng);同時(shí)采用FCM進(jìn)行細(xì)胞周期分布及凋亡率的分析;Hoechst33258熒光染色觀察HEC-1-B細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化。用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:
1蘆薈大黃素對HEC-1-B細(xì)胞增殖的影響
(1)MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,對照組的吸光度(OD值)明顯高于20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160
3、μmol/L的蘆薈大黃素組(P<0.01),且在該濃度范圍內(nèi)呈劑量依賴性。提示蘆薈大黃素可抑制HEC-1-B細(xì)胞的增殖。
(2)Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對照組比較,20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L的蘆薈大黃素組作用48h后,PCNA蛋白表達(dá)隨藥物濃度的增加而逐漸減弱(P<0.01),呈劑量依賴性。提示蘆薈大黃素可抑制HEC-1-B細(xì)胞內(nèi)PCNA蛋白的表達(dá)。
2H
4、EC-1-B細(xì)胞周期和凋亡的檢測
(1)細(xì)胞周期檢測結(jié)果顯示,與對照組比較,蘆薈大黃素對HEC-1-B細(xì)胞周期干擾48h后,將HEC-1-B細(xì)胞周期阻滯在G2/M期(P<0.01),且在一定濃度(20~160)μmol/L范圍內(nèi),G2/M期的比例隨蘆薈大黃素濃度的增加而增加,呈劑量依賴性。提示蘆薈大黃素可抑制其細(xì)胞周期的進(jìn)展。
(2)細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果顯示,蘆薈大黃素各組HEC-1-B細(xì)胞的凋亡率與對照組比較,明顯增加
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