谷氨酰胺對脂多糖刺激16HBE細(xì)胞的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：探討谷氨酰胺（Gln）在脂多糖（LPS）刺激的人支氣管上皮細(xì)胞(16HBE)細(xì)胞中的保護(hù)作用及熱休克蛋白70（HSP70）、Toll樣受體4（TLR4）的表達(dá)影響。
　　 方法：體外培養(yǎng)16HBE細(xì)胞，分為五組，包括對照組、LPS組（1μg/ml）、0.5mmol/LGln+1μg/ml LPS組、10mmol/LGln+1μg/ml LPS組、1μg/ml LPS+10mmol/L Gln組。前四組Gln在LPS刺激前8

2、小時加入，最后一組Gln與LPS同時加入。每組5孔，LPS刺激24小時。MTT比色法于波長490nm酶聯(lián)免疫測定儀處測定OD值，觀察細(xì)胞存活情況。Real-time PCR測定HSP70、TLR4的mRNA相對含量。
　　 結(jié)果：MTT對細(xì)胞活力的檢測結(jié)果：①與對照組相比，LPS組細(xì)胞存活率明顯降低（P<0.05）；②與LPS組相比，10mmol/LGln+LPS組細(xì)胞存活率升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；③與0.5mm

3、ol/LGln+LPS組比較，高濃度10mmol/LGln+LPS組細(xì)胞存活率明顯升高（P<0.05）；④與同時給予LPS+10mmol/LGln組比較，提前給予10mmol/LGln+LPS組細(xì)胞存活率明顯改善（P<0.05）。
　　 Real-time PCR對HSP70、TLR4mRNA檢測結(jié)果：①與LPS組比較，10mmol/LGln+LPS組細(xì)胞HSP70 mRNA表達(dá)上調(diào)、TLR4 mRNA下調(diào)，表達(dá)量差異有統(tǒng)計學(xué)意

4、義（P<0.05）；②與0.5mmol/LGln+LPS組比較，高濃度10mmol/LGln+LPS組細(xì)胞HSP70、TLR4表達(dá)的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；③與同時給予LPS+10mmol/LGln組比較，提前給予10mmol/L Gln+LPS組細(xì)胞HSP70、TLR4mRNA含量差異亦顯著（P<0.05）
　　 結(jié)論：谷氨酰胺對LPS刺激的16HBE細(xì)胞具有一定程度的保護(hù)作用，且與給藥時間和濃度有密切關(guān)系；HSP7