谷氨酰胺對(duì)新生大鼠胃腸道功能保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:谷氨酰胺(Glutamine,Gin)相關(guān)研究是營(yíng)養(yǎng)和代謝領(lǐng)域最為關(guān)注的研究課題之一。本文進(jìn)行Gin相關(guān)研究以期待對(duì)危重病人以及危重新生兒進(jìn)行更好的營(yíng)養(yǎng)支持。我們利用MS(methionine sulfoximine),人為造成新生幼鼠體內(nèi)Gin缺乏來(lái)模擬新生兒出生后低Gln的狀態(tài)從而進(jìn)行腸道改變的研究,在母鼠喂養(yǎng)條件下造成新生大鼠谷氨酰胺缺乏后,觀察新生鼠胃腸道改變。在此基礎(chǔ)上,利用內(nèi)毒素造成新生大鼠內(nèi)毒素血癥,觀察谷氨酰胺對(duì)胃

2、腸道結(jié)構(gòu)和功能的保護(hù)情況。
　　 方法:
　　 第一部分實(shí)驗(yàn)購(gòu)買(mǎi)清潔級(jí)的SD母鼠及新生鼠共5窩。每1窩為一組,并按照試驗(yàn)要求隨機(jī)分組研究,新生小鼠進(jìn)行標(biāo)記,每天進(jìn)行稱(chēng)重。分組情況:第1組母鼠分娩后第3天起不用MS×6天+新生幼鼠生后第3天起不用MS×6天;
　　 第2組母鼠分娩后第3天起腹腔注射MS×6天+新生幼鼠生后不用MS×6天;
　　 第3組母鼠分娩后第1天起腹腔注射MS×6天+新生幼鼠生后不用MS

3、×6天;
　　 第4組母鼠分娩后第3天起腹腔注射MS×6天+新生幼鼠生后第3天起腹腔注射MS×6天;
　　 第5組母鼠分娩后不用MS×6天+新生幼鼠生后3天起腹腔注射MS×6天;
　　 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到第7天,在稱(chēng)量后處死新生幼鼠,取材分別在光鏡和電鏡下觀察胃腸粘膜的結(jié)構(gòu)變化,同時(shí)測(cè)定腸上皮細(xì)胞膜脂質(zhì)流動(dòng)性。
　　 第二部分實(shí)驗(yàn)購(gòu)買(mǎi)清潔級(jí)的SD母鼠及新生鼠共4窩。每1窩為一組,并按照試驗(yàn)要求隨機(jī)分組研究,新生小

4、鼠進(jìn)行標(biāo)記,每天進(jìn)行稱(chēng)重。分組情況:取第一部分實(shí)驗(yàn)中的第4組(母鼠分娩后第3天起腹腔注射MS+新生幼鼠生后第3天起腹腔注射MS)重新做動(dòng)物模型(谷氨酰胺完全缺乏模型),并作為實(shí)驗(yàn)組,正常喂養(yǎng)幼鼠作為對(duì)照組。
　　 第1組:實(shí)驗(yàn)組+生后第3天起腹腔注射Gln×6天+6天后LPS腹腔注射;
　　 第2組：實(shí)驗(yàn)組+生后第3天起不腹腔注射Gln×6天+6天后LPS腹腔注射;
　　 第3組：對(duì)照組+生后第3天起腹腔注射Gl

5、n×6天+6天后LPS腹腔注射;
　　 第4組:對(duì)照組+生后第3天起不腹腔注射Gln×6天+6天后LPS腹腔注射;
　　 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到第7天,在腹腔注射LPS后6小時(shí)稱(chēng)量體重,然后處死新生幼鼠,取材分別在光鏡和電鏡下觀察胃腸粘膜的結(jié)構(gòu)變化,同時(shí)測(cè)定腸上皮細(xì)胞膜脂質(zhì)流動(dòng)性。
　　 結(jié)果:第一部分實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)過(guò)對(duì)5組新生幼鼠的不同處理方式,造成了各組之間腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的顯著變化。第1組作為正常對(duì)照組與其余4組相比,腸道絨毛

6、和微絨毛最完整,排列最為整齊不雜亂,且腸上皮細(xì)胞膜流動(dòng)性最好。相反,第4組由于母鼠和新生幼鼠同時(shí)進(jìn)行MS腹腔注射,對(duì)于新生幼鼠而言?xún)?nèi)源性和外源性來(lái)源的Gln同時(shí)受到抑制,腸道絨毛和微絨毛的完整性也最差,排列最雜亂,腸上皮細(xì)胞膜流動(dòng)性也最差。另外3組的改變介于上述兩組之間。
　　 第二部分實(shí)驗(yàn)中,內(nèi)毒素血癥情況下,4組新生幼鼠采取不同處理方式,各組之間腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)亦變化顯著。第2組作為典型實(shí)驗(yàn)組與其余3組相比,幼鼠腸上皮細(xì)胞膜流動(dòng)

7、性最差,腸道絨毛的排列最雜亂,腸粘膜結(jié)構(gòu)和微絨毛的超微結(jié)構(gòu)最不完整,腸道功能受損明顯。第1組由于額外補(bǔ)充外源性Gln,上皮細(xì)胞膜流動(dòng)性有改善,腸黏膜損傷程度減輕,絨毛有修復(fù)。第3和4組比較,兩組腸道改變情況相似,沒(méi)有顯著差別,但較前兩組損傷明顯較輕。
　　 結(jié)論:(1)實(shí)驗(yàn)證實(shí),不同程度谷氨酰胺缺乏確實(shí)可以造成新生大鼠胃腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能改變;(2)可以選擇第一部分實(shí)驗(yàn)中變化最為明顯的第4組,即母鼠分娩后第3天新生幼鼠生后第3天