慶大霉素C族復(fù)合物含量的檢測方法及辛伐他汀藥動學(xué)的初步研究.pdf

1、藥品質(zhì)量控制是藥品安全性和有效性研究的基礎(chǔ)。藥品的質(zhì)量控制研究貫穿于藥物研發(fā)、上市及存在過程的始終。為確保硫酸慶大霉素和辛伐他汀的藥品質(zhì)量,本論文對硫酸慶大霉素發(fā)酵液C族復(fù)合物含量的檢測方法和人血漿中辛伐他汀的檢測方法進行了探討和研究。
　　 本課題主要是建立慶大霉素發(fā)酵液中C族復(fù)合物含量的快速檢測方法,及時、快速地跟蹤檢測在同一發(fā)酵罐不同時間下發(fā)酵液以及不同發(fā)酵條件下中慶大霉素發(fā)酵液C族復(fù)合物組分的含量,從而可以較快地判斷出最

2、佳的發(fā)酵條件,使慶大霉素的發(fā)酵產(chǎn)品更理想。首先通過對慶大霉素薄層色譜檢測方法的的研究,確立了快速簡單地測定慶大霉素組分的方法。通過較全面地優(yōu)化分析,得到最佳的薄層色譜(TLC)檢測體系為用0.5％CMC-Na進行鋪板,自然晾干,臨用前在105℃下活化1h;展開劑配比為氯仿:甲醇:28%氨水為1:1:1(V:V:V),靜置分層,上相飽和,下相展開;展層高度為20cm,碘蒸氣顯色5min。其次,對慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)品進行TLC定量掃描考察,得出C

3、1、C2、C1a組分分別在3.33～11.67μg、5.84～20.45μg、3.11～10.89μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,三組分的重復(fù)性、穩(wěn)定性和樣品回收率均較理想,符合要求。最后通過TLC定量掃描方法對慶大霉素發(fā)酵液樣品進行測定,得出大約在90h左右C組分的總含量會達到最高。并且可以跟蹤監(jiān)測不同時間點的C1、C2、C1a的各自含量,快速、及時地對慶大霉素的發(fā)酵進行反饋,保障了高效率地發(fā)酵出較理想的慶大霉素產(chǎn)品。
　　 本課題

4、還建立了一種專屬性強、靈敏度高、操作簡單易行的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS),測定不同時間人血漿中辛伐他汀和辛伐他汀羥基酸濃度,并通過簡單的預(yù)實驗驗證了該方法的可行性。本實驗采用色譜柱為BEHC18(2.1×50mm,1.7μm),流動相為乙腈-0.01mol·L-1醋酸銨(72:28),電噴霧離子化(ESI),正離子模式多重反應(yīng)選擇離子檢測(MRM),辛伐他汀、辛伐他汀羥基酸及內(nèi)標(biāo)洛伐他汀的檢測離子對分別為m/z4

5、19.41→199.15,437.41→303.28,405.43→199.13,測定不同的時間點人血漿中辛伐他汀和辛伐他汀羥基酸濃度。結(jié)果,血漿樣品中辛伐他汀線性范圍為0.241～61.76 ng·mL-1(r=0.999,n=5);辛伐他汀羥基酸線性范圍為0.344～88.16ng·mL-1(r=0.997,n=5)。日內(nèi)、日間精密度(RSD)均小于15%,方法的平均回收率為辛伐他汀100.6%;辛伐他汀羥基酸106.0%。血漿基質(zhì)

6、對血漿中的辛伐他汀和辛伐他汀羥基酸測定無干擾。之后考察了2名健康志愿者口服辛伐他汀片20mg后體內(nèi)辛伐他汀和辛伐他汀羥基酸的經(jīng)時血藥濃度,并采用DAS2.0軟件處理數(shù)據(jù),計算了相關(guān)的主要藥代動力學(xué)參數(shù)T1/2、Cmax、Tmax、AUCo～t、AUCo～∞。通過預(yù)實驗,證實了所建立的UPLC-MS/MS法是一種簡單、靈敏、快速、可行的分析方法,可以更好地研究辛伐他汀在人體內(nèi)的藥物代謝情況,為辛伐他汀的藥品質(zhì)量控制和臨床合理用藥等研究提供