輔酶復合物原料藥的提取工藝研究.pdf

1、輔酶是人體物質(zhì)代謝中重要而不可缺少的輔助因子。輔酶復合物因富含多種活性成分(輔酶A、輔酶I、GSH、ATP等)及其相互間的協(xié)同增效功能，而對機體的新陳代謝、蛋白質(zhì)合成、組織及生理功能的動態(tài)平衡等具有重要的促進作用，是臨床上治療急慢性肝炎、原發(fā)性血小板減少性紫癜、冠狀動脈硬化、腎功能不全等疾病的重要輔助藥物。有關輔酶復合物的提取工藝國內(nèi)外少有報道。本文從工業(yè)化生產(chǎn)輔酶復合物的角度出發(fā)，以成本低廉的酵母為原料，輔酶單體的生產(chǎn)工藝為基礎，進行

2、了提取工藝的篩選和研究。 論文首先對酵母細胞的破壁方法進行了比較研究，得出溫差破壁法為生產(chǎn)輔酶復合物的最佳破壁工藝。經(jīng)正交試驗顯示，其最優(yōu)化的工藝條件是料液比3，保溫溫度90℃，保溫時間5 min。破壁后輔酶復合物的得率達到了39％。 在對破壁液分離步驟的研究中，分析比較了輔酶單體成分常用的活性炭吸附層析及超濾分離技術，確定了采用超濾技術代替活性炭層析，其所得結果不但避免了后者的堿性洗脫液對輔酶活性的破壞，而且提高了整個

3、工藝的分離效率，使工藝流程更為簡潔、流暢。經(jīng)過對D85＃、D315#、717#、732#等四種離子交換樹脂分離純化能力的比較實驗，結果顯示717#樹脂對輔酶復合物的吸附能力、分離效果最好，并通過對該樹脂的分級洗脫試驗和最佳洗脫條件的摸索，確定了能使輔酶復合物一步洗脫分離的洗脫體系(洗脫液濃度為0.2 mol/L NaCl-0.02 mol/LHCl)，從而有效地保證了各活性成分的相對穩(wěn)定性，更好地發(fā)揮復方制劑的協(xié)同增效作用。 輔

4、酶復合物的提取工藝流程(工藝流程-3)為酵母原料→溫差破壁→超濾提取→樹脂層析→濃縮→丙酮沉淀→原料藥。本工藝具有穩(wěn)定性好、產(chǎn)品得率高、操作簡單，適于工廠生產(chǎn)所要求的無縫式、連續(xù)化、自動化操作等特點。利用本工藝制得的原料藥中輔酶A、輔酶I純度分別為1.7861 u/mg、1.765μg/mg、純度比值為1.01，原料藥總得率為3.35％、理論制劑得率為112支/200 g干酵母投料，完全達到或優(yōu)于規(guī)定的技術指標，其余指標也都符合國家藥品