干擾素-γ及白細胞介素-4在膽脂瘤型中耳炎的表達及意義.pdf

1、目的：膽脂瘤型中耳炎是一種以上皮細胞增殖、角化、脫落、堆積和骨質(zhì)破壞為特征的慢性中耳炎性疾病。它常破壞聽骨鏈、面神經(jīng)管及中耳腔周圍骨質(zhì)，引起嚴重聽力下降及各種顱內(nèi)外并發(fā)癥。其發(fā)病的確切機制至今仍不十分清楚。已證實免疫因素在膽脂瘤型中耳炎的發(fā)病機制中起到重要作用。在膽脂瘤標(biāo)本中我們可以觀察到大量免疫細胞如T細胞、巨噬細胞、肥大細胞、朗格漢斯細胞等。有學(xué)者認為，膽脂瘤上皮的異常增殖行為及其周圍骨質(zhì)的破壞，與這些浸潤的免疫細胞及其釋放的多種不

2、同細胞因子有密切關(guān)系。Th1/Th2免疫系統(tǒng)平衡及失調(diào)一直是學(xué)者們研究的熱點。Th1/Th2平衡失調(diào)與機體多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。由于尚未發(fā)現(xiàn)明確的表面標(biāo)志，目前區(qū)分Th1/ Th2細胞亞群仍根據(jù)其所產(chǎn)生的細胞因子及其生物效應(yīng)來確定。在某種意義上，可以把IFN-γ和IL-4分別作為Th1和Th2細胞的標(biāo)志性細胞因子，通過檢測這兩種細胞因子的含量可以間接反映兩種細胞亞群的功能與狀態(tài)。IFN-γ做為一種重要的細胞因子，它可以調(diào)控各種免疫

3、細胞（T細胞、朗格漢斯細胞、肥大細胞等）及細胞因子（IL-1、IL-6、TNF-α等）的生成，在機體免疫反應(yīng)中起到關(guān)鍵作用。IFN-γ既可以與角質(zhì)細胞（KC）相互作用，促進上皮增生；又可以調(diào)節(jié)破骨細胞的生成，影響骨質(zhì)吸收。有報道IFN-γ受體在中耳膽脂瘤基底層中高表達，但IFN-γ與膽脂瘤型中耳炎發(fā)病機制的研究，國內(nèi)外迄今未見報道。本實驗采用連續(xù)切片免疫組化及流式細胞分析技術(shù)分別檢測中耳膽脂瘤手術(shù)切除標(biāo)本及中耳膽脂瘤患者外周血中IFN-

4、γ及IL-4的表達情況，間接分析了Th1/Th2的平衡漂移情況，探討中耳膽脂瘤患者局部及全身免疫情況的改變，加深和豐富了我們對膽脂瘤型中耳炎發(fā)病機制的認識，為以后應(yīng)用免疫制劑治療該病提供理論依據(jù)。
　　 方法：⑴選取符合納入標(biāo)準(zhǔn)的汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科2007年7月-2008年5月住院中耳膽脂瘤患者30例作為實驗組，采集手術(shù)切除標(biāo)本30份，其中男性14例，女性16例；年齡11-56歲，中位數(shù)年齡37歲。標(biāo)本均

5、常規(guī)行HE染色，確診為中耳膽脂瘤。同時選取行鼓膜修補術(shù)病人的外耳道皮膚20例做為對照組。所有受檢者實驗前2周內(nèi)均無全身或局部使用糖皮質(zhì)激素及免疫制劑。所有標(biāo)本經(jīng)過處理（固定、包埋、切片等）后，用免疫組化法檢測標(biāo)本中IFN-γ和IL-4的表達情況。⑵抽取上述實驗組病人空腹外周血約1ml于肝素抗凝管中，搖勻；并選取同期我院健康體檢者20例做為正常對照組，其中男性12例，女性8例；年齡20-62歲，中位數(shù)年齡31歲。所有血液標(biāo)本經(jīng)過處理（固定

6、、染色等）后，用流式細胞分析儀檢測外周血T細胞中IFN-γ和IL-4的表達情況。
　　 結(jié)果：①中耳膽脂瘤上皮下組織的基底層中聚集了大量的炎性細胞。②中耳膽脂瘤組織中IFN-γ的表達高于正常對照組，其差異有顯著性意義（p<0.05）。③中耳膽脂瘤組織中IL-4的表達與正常對照組的差異無顯著性意義（P>0.05）。④膽脂瘤型中耳炎患者外周血CD3+ IFN-γ+T的百分率較正常對照組明顯升高，兩組差異有顯著性意義（p<0.05）；

7、CD3+IL-4+T細胞的百分率與正常對照組相比，差異無顯著性意義（p>0.05）；CD3+ IFN-γ+T/ CD3+IL-4+T的比值較正常對照組顯著增大，差異有顯著性意義（p<0.05）。
　　 結(jié)論：⑴在中耳膽脂瘤組織中，與對照組外耳道皮膚相比，IFN-γ大部分呈陽性表達，部分呈強陽性表達，主要位于膽脂瘤上皮下的基底層中，因此，我們推測IFN-γ在中耳膽脂瘤的發(fā)病中可能起到關(guān)鍵作用。⑵膽脂瘤標(biāo)本中IFN-γ表達較高，IL