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1、目的:1.探討皮下局部注射rCTGF對(duì)超長(zhǎng)比例皮瓣成活的影響和可能的機(jī)制;2.局部注射在近期內(nèi)是否會(huì)引起遠(yuǎn)位組織的纖維化。方法:32只雌性SD大鼠,隨機(jī)分成四組,對(duì)照組和3組實(shí)驗(yàn)組。在大鼠背部形成8cm×2cm的超長(zhǎng)全厚隨意皮瓣。術(shù)后即刻給予下列處理:在分別距蒂端4cm,7cm的中線處作為注射點(diǎn)。對(duì)照組每個(gè)位點(diǎn)皮下注射生理鹽水0.5ml;rCTGFa組每個(gè)位點(diǎn)皮下注射120ngrCTGF;rCTGFb組每個(gè)位點(diǎn)皮下注射160ngrCTG
2、F;rCTGFc組每個(gè)位點(diǎn)皮下注射200ngrCTGF。每個(gè)位點(diǎn)的注射溶液量均為0.5ml。在兩分鐘內(nèi)將藥物注射完畢,立即原位縫合皮瓣。術(shù)后10天用圖像分析軟件測(cè)量皮瓣成活面積及成活百分率。將皮瓣平均分成近,中,遠(yuǎn)三段,選取分別距蒂部1.5cm,4.5cm和7cm的皮瓣組織塊進(jìn)行石蠟包埋,切片和HE染色。并用Ⅷ因子對(duì)皮瓣的近,中兩段組織中的血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行免疫組化染色,在20×10光鏡下對(duì)血管數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。同時(shí)取肝腎組織進(jìn)行HE染色在光鏡
3、下觀察肝腎組織的纖維化改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,spss11.5進(jìn)行單因素方差分析和兩兩比較,p<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.術(shù)后10天皮瓣存活面積(cm2)及存活率:對(duì)照組為8.0566±1.0856cm2(50.35±6.78%),rCTGF120ng組為10.1408±0.4348cm2(63.38±2.72%),rCTGF160ng組為10.3871±0.5005cm2(64.92±3.13%),rCTGF200ng
4、組為11.9938±0.6595cm2(74.96±4.12%)。三個(gè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組均有顯著性差異(p<0.05),且隨著rCTGF劑量的增加,皮瓣存活面積也增加。三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的組間比較,200ng組與120ng和160ng組的皮瓣存活面積及存活率均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。p值均小于0.01。而120ng組與160ng組之間則無明顯差異,p=0.0606,p>0.05,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.皮瓣血管數(shù):對(duì)照組的近段皮瓣血管數(shù)為13.88±1.959,
5、三個(gè)實(shí)驗(yàn)組皮瓣近段血管數(shù)分別為21.00±3.423,27.38±3.114,37.38±3.583。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比均有顯著性差異(p<0.05)。各組皮瓣中段血管數(shù)分別為9.50±1.927,15.50±2.777,24.63±3.335和28.63±4.984,各組之間的p值均<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.肝腎組織纖維化改變:術(shù)后10天對(duì)每組動(dòng)物的肝腎組織進(jìn)行普通HE染色未發(fā)現(xiàn)有明顯組織纖維化跡象。結(jié)論:局部注射rCTGF能誘導(dǎo)
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