結(jié)締組織生長(zhǎng)因子對(duì)體外人晶狀體上皮細(xì)胞的影響研究.pdf

1、目的： (1)研究結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)對(duì)體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞(HLECs)增殖、轉(zhuǎn)分化和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成的影響，以期探討CTGF在后囊膜混濁(PCO)發(fā)病機(jī)制中的作用：(2)研究轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)對(duì)體外培養(yǎng)的HLECs表達(dá)CTGF的影響。 方法： (1)采用不同濃度(0、5、15、30、60ng/ml)的CTGF對(duì)體外培養(yǎng)的HLECs進(jìn)行誘導(dǎo)，

2、分別培養(yǎng)8、16、32、48h后用MTT比色法檢測(cè)CTGF對(duì)HLECs增殖的影響；培養(yǎng)24h后用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法及RT-PCR法檢測(cè)CTGF對(duì)HLECs誘導(dǎo)表達(dá)α-平滑肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、纖維連接蛋白(FN)、Ⅳ型膠原(COL-Ⅳ)的影響；(2)將HLECs分為正常對(duì)照組、TGF-β1組、TNF-α組及TGF-β1+TNF-α組，分別培養(yǎng)24h后用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法及RT-PCR方法檢測(cè)CTGF的表達(dá)情況。 結(jié)果：

3、 (1)不同濃度CTGF(5、15、30、60ng/ml)對(duì)體外培養(yǎng)的HLECs增殖起促進(jìn)作用(P<0.01或P<0.05)，當(dāng)濃度為30 ng/ml時(shí)達(dá)到最大促增殖效果；濃度一定時(shí)，CTGF對(duì)HLECs的增殖作用在一定范圍內(nèi)呈時(shí)間依賴關(guān)系(P<0.01)；CTGF能夠誘導(dǎo)HLECs表達(dá)α-SMA、FN和COL-Ⅳ，并且這種作用隨濃度的增加而增強(qiáng)，每?jī)山M之間的比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)。(2) TGF-β1組HL

4、ECs內(nèi)CTGF表達(dá)明顯增加，與正常對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；在TGF-β1+TNF-α組，CTGF的表達(dá)受到抑制，與TGF-β1組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論： (1) CTGF可以促進(jìn)HLECs的增殖，誘導(dǎo)α-SMA、FN和COL-Ⅳ的表達(dá)，這可能是后囊混濁的發(fā)病機(jī)制之一。(2) TGF-β1能夠促進(jìn)HLECs內(nèi)CTGF的表達(dá)，TNF-α則抑制CTGF的表達(dá)，TNF-α可能是TGF-