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1、目的:觀察玉葵清(YKQ)對(duì)糖基化終產(chǎn)物(AGEs)干預(yù)體外培養(yǎng)的人腎系膜細(xì)胞(HRMC)的增殖及結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)表達(dá)的影響,探討玉葵清防治對(duì)糖尿病腎病的作用機(jī)制。 方法:采用中藥血清藥理學(xué)的方法制備復(fù)方中藥——玉葵清含藥血清,用葡萄糖和牛血清白蛋白體外孵育制備AGEs,干預(yù)體外培養(yǎng)的HRMC。用四唑鹽比色試驗(yàn)(MTT)法測(cè)定系膜細(xì)胞的增殖率;分別用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法和蛋白免疫印跡方法測(cè)定H
2、RMC CTGF mRNA和蛋白水平。 結(jié)果: 1、不同濃度的鼠血清組(RS)和無(wú)血清對(duì)照組比較,前者顯著增加HRMC的增殖并呈濃度依賴性;不同濃度鼠血清和.AGEs共同干預(yù)組(RS+AGEs)與RS及無(wú)血清對(duì)照組比較,RS十AGEs組顯著增加HRMC增殖,并且呈濃度依賴性; 2、濃度為10﹪常規(guī)劑量的玉葵清含藥血清較對(duì)照組顯著減輕AGEs干預(yù)的HRMC的增殖;濃度為0.625﹪和1.25﹪的加倍劑量玉葵清含藥血
3、清較對(duì)照組顯著減輕AGEs干預(yù)的:HRMC的增殖;濃度為0.313﹪、0.625﹪和1.25﹪的加倍劑量玉葵清含藥血清較常規(guī)劑量組含藥血清顯著減輕.AGEs干預(yù)的HRMC的增殖; 3、玉葵清含藥血清呈時(shí)間依賴減輕.AGEs干預(yù)的人系膜細(xì)胞CTGF mRNA和蛋白水平的表達(dá),在干預(yù)8小時(shí)時(shí)CTGF mRNA及蛋白的表達(dá)較對(duì)照組下降,并隨時(shí)間延長(zhǎng),下降更顯著,在72小時(shí)達(dá)到最低;3、玉葵清含藥血清濃度在0.313﹪、0.625﹪和1
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