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文檔簡介
1、目的:探討復(fù)方甘草甜素脂質(zhì)體對體外培養(yǎng)人肝星狀細(xì)胞( hepatic stellate cell,HSC)增殖的影響,以探討抗肝纖維化新藥物劑型。
方法:1.用超聲薄膜法制備復(fù)方甘草甜素脂質(zhì)體。
2.體外培養(yǎng)人HSC株,在對數(shù)生長期細(xì)胞培養(yǎng)液中分別加入藥物如下:1)單純HSC對照組;2)單純脂質(zhì)體對照組;3)復(fù)方甘草甜素對照組0.03125、0.0625、0.125和0.25mg/ml;4)復(fù)方甘草甜素脂質(zhì)體0.03
2、125、0.0625、0.125和0.25mg/ml,共同培養(yǎng)24h后,應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽法檢測細(xì)胞增殖率。
3.Giemsa染色后顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化并使用計算機圖文分析系統(tǒng)細(xì)胞測量程序計算各組細(xì)胞占每個視野中的面積百分比(C%)。
結(jié)果:1.MTT法顯示,不同濃度的復(fù)方甘草甜素及其脂質(zhì)體作用HSC24 h, HSC增殖的抑制率均明顯高于單純脂質(zhì)體組和單純HSC對照組,相同濃度的復(fù)方甘草甜素脂質(zhì)體組HSC增殖
3、的抑制率亦高于復(fù)方甘草甜素對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);而單純HSC對照組和單純脂質(zhì)體組HSC增殖的抑制率則無明顯差別(P>0.05);在一定濃度范圍內(nèi)(0.0625mg/ml~0.25mg/ml),增殖的抑制率的遞增呈濃度依賴性;
2.Giemsa染色后顯微鏡下發(fā)現(xiàn)實驗組細(xì)胞數(shù)隨藥物濃度增大而減少,細(xì)胞變形,相同濃度的復(fù)方甘草甜素脂質(zhì)體組細(xì)胞數(shù)較復(fù)方甘草甜素組少,而單純HSC對照組與單純脂質(zhì)體組則無明顯差別;計算
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