楊梅樹皮、楊梅葉和楊梅果體外抗氧化物質基礎研究.pdf

1、楊梅(Myrica rubra(Lour.) Sieb.et Zucc.)系楊梅科（Myricaceae）楊梅屬（Myrica）多年生常綠喬木。楊梅樹皮、葉、果具有抗氧化、神經(jīng)細胞保護以及抗腫瘤等多種藥理活性。本論文將探討楊梅樹皮、葉和果發(fā)揮體外抗氧化活性的物質基礎。
　　首先采用化學評價和細胞評價分別對楊梅樹皮、葉和果提取物進行體外抗氧化能力評價?；瘜W評估法選擇自由基清除法(DPPH·)和總還原能力測定法(FRAP)，以上實驗得

2、到的抗氧化活性順序為:樹皮＞果＞葉;細胞評價法采用H2O2誘導的PC12細胞氧化應激損傷模型，MTT檢測結果表明:楊梅樹皮提取物在25-50μg/ml、楊梅果提取物濃度≥50μg/ml具有明顯的細胞保護活性，而楊梅葉提取物則無明顯保護作用。流式細胞檢測結果亦證明:楊梅樹皮和楊梅果提取物均具有明顯的抗細胞凋亡作用，而楊梅葉無明顯抗細胞凋亡作用。相關氧化應激指標檢測表明:楊梅樹皮和楊梅果提取物能夠顯著地抑制H2O2引起的PC12細胞內ROS

3、的增多和MDA的形成，并增加H2O2引起PC12細胞內SOD的降低。化學和細胞體外抗氧化活性評價均證明楊梅樹皮具有良好的抗氧化作用。
　　為深入了解楊梅樹皮的化學成分，進一步尋找其活性物質，采用正相硅膠、Sephadex LH-20和制備液相等多種色譜方法從楊梅樹皮醇提取物中分離得到14個化合物，并通過化合物的理化性質和UV、IR、NMR、MS等波譜數(shù)據(jù)進行結構鑒定，其中二苯基庚烷類化合物4個:3，5-二甲氧基-4-羥基楊梅醇，楊

4、梅醇，楊梅酮，Myricanol11-Sulfate;黃酮類化合物3個:楊梅苷，槲皮素，槲皮苷;三萜及甾醇類化合物7個:檉柳醇，熊果醇，熊果酸，蒲公英賽醇，楊梅萜二醇，β-谷甾醇，胡蘿卜苷。其中化合物3，5-二甲氧基-4-羥基楊梅醇為新化合物，化合物檉柳醇、熊果醇為首次從該屬植物中分離得到。
　　對6個主要化合物（楊梅醇、楊梅酮、Myricanol11-Sulfate、楊梅苷、槲皮素、槲皮苷）進行抗氧化應激活性篩選，分別采用H2O

5、2和谷氨酸誘導的PC12細胞氧化應激損傷模型進行活性篩選，結果表明3個黃酮類化合物對兩個模型均具有良好的細胞保護活性，以楊梅苷活性最強;而3個二苯基庚烷，只有化合物Myricanol11-Sulfate因11位被磺酸基取代，具有較好的保護活性。流式細胞檢測進一步證明化合物楊梅苷和Myricanol11-Sulfate可部分逆轉谷氨酸損傷導致的細胞凋亡;氧化應激相關指標的檢測結果同樣證明楊梅苷和Myricanol11-Sulfate能夠有

6、效地抑制ROS的增多和MDA的形成同時增加細胞內SOD的含量。
　　為了進一步闡明楊梅樹皮、葉和果三個部位抗氧化活性的物質基礎，采用UPLC-PDA、UPLC/QTof-MS結合主成分分析對三者的化學成分進行比較研究，結果表明樹皮和葉中主要含有黃酮和二苯基庚烷類成分，果中主要含有黃酮和酚酸類成分;主成分分析(principle component analysis，PCA)表明，楊梅樹皮與楊梅葉的化學組成相近，但楊梅果與二者化學成