DHL-RADA-16自組裝活性多肽納米纖維支架凝膠對(duì)兔髓核細(xì)胞的作用.pdf

1、目的：應(yīng)用自組裝DHL/RADA-16多肽納米纖維支架凝膠與兔髓核細(xì)胞（nucleus pulposus cells，NPCs）聯(lián)合培養(yǎng)，觀察其對(duì)NPCs的作用。
　　 方法：3周齡健康日本大耳白兔，取其胸腰段椎間盤(pán)髓核組織，提取培養(yǎng)髓核細(xì)胞，用甲苯胺藍(lán)和二型膠原免疫組化法鑒定髓核細(xì)胞。等量的細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM-F12觸發(fā)多肽溶液DHL-PA+RADA-16-PA（1：1）使其自組裝成DHL/RADA-16（實(shí)驗(yàn)組），將髓核細(xì)胞

2、與自組裝納米材料復(fù)合培養(yǎng)（實(shí)驗(yàn)組）以及髓核細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)（對(duì)照組），觀察自組裝納米材料對(duì)髓核細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。
　　 結(jié)果：原子力顯微鏡顯示DHL/RADA-16形成了納米級(jí)纖維；免疫組化法對(duì)髓核細(xì)胞的鑒定：成功分離培養(yǎng)髓核細(xì)胞，甲苯胺藍(lán)染色（+），二型膠原抗體（+）；將DHL/RADA-16（實(shí)驗(yàn)組）納米材料與髓核細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)，Calcein-AM/PI死、活細(xì)胞染色，活細(xì)胞數(shù)達(dá)95％以上，CCK-8間接計(jì)數(shù)顯示DHL/RA