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文檔簡介
1、目的:觀察體外自組裝IKVAV納米纖維凝膠對骨髓源性神經(jīng)干細胞增殖、毒性及向神經(jīng)元分化比列的影響。
方法:實驗分為干細胞組、凝膠組及聯(lián)合培養(yǎng)組。采用SP法行Nestin免疫細胞化學染色鑒定培養(yǎng)的細胞。在各實驗組細胞培養(yǎng)后的1、3、7、14天用在采用CCK-8法檢測各組細胞的增殖率,MTT法檢測各組細胞的毒性,流式細胞儀分析各組神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元分化的比例。流式細胞儀分析細胞周期。
結(jié)果:誘導分化的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)1d后
2、即可見到細胞聚集,3 d后可見小的神經(jīng)球形成并逐漸長大,7 d神經(jīng)球體積約為100um,神經(jīng)球飽滿,邊緣細胞形成桑椹樣顆粒。Nestin染色呈陽性表達。CCK-8法檢測結(jié)果示:共培養(yǎng)組細胞增殖率在各時間點明顯高于干細胞組和凝膠組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);共培養(yǎng)組中細胞增殖率在第7天左右達峰值(0.58±0.02);干細胞組的細胞增殖率在第7天也到達峰值(0.4467±0.2517);凝膠組未見有細胞增殖。MTT法檢測結(jié)果示:三
3、實驗組未見細胞毒性,各組間無差異(P=0.82)。流式細胞儀分析 NSC向神經(jīng)元分化的比例:共培養(yǎng)組神經(jīng)干細胞分化為神經(jīng)元的細胞比例在個時間點均高于其余兩組(P<0.05)。共培養(yǎng)組在1d、3d、5d、7d、10d、14d分化為神經(jīng)元的細胞比例各為:2.1%、3.0%、4.6%、7.1%、5.8%、2.7%;干細胞中分化為神經(jīng)元的細胞比例為:1.9%、2.3%、3.5%、4.7%、3.1%、1.6%;凝膠組未見神經(jīng)元。
結(jié)論:
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