FN在人絨毛膜癌細胞的表達及FUDR對絨癌細胞抑制的作用研究.pdf

1、目的：
　　 (1)檢測纖維粘連蛋白(fibronectin,FN)在人絨毛膜癌不同侵襲力細胞JEG-3和JAR內的表達,探討FN高表達與絨毛膜癌侵襲轉移的關系；
　　 (2)研究氟尿嘧啶脫氧核苷(floxuridine,FUDR)對絨毛膜癌高侵襲力JEG-3細胞生長能力的抑制作用,并與5-氟尿嘧啶進行比較,觀察兩種藥物影響JEG-3細胞生長能力的差異并比較藥物作用后JEG-3細胞中FN的表達改變。
　　 方法：

2、
　　 (1)運用Matrigel體外侵襲實驗方法,檢測兩種絨毛膜癌細胞JEG-3和JAR侵襲能力,并比較差異；
　　 (2)運用熒光定量-聚合酶鏈反應(real time-polymerase chainreaction,RT-PCR)及蛋白免疫印跡(Western blotting)方法,檢測絨毛膜癌細胞JEG-3和JAR中FN mRNA和蛋白表達情況,并比較兩者間的差異；
　　 (3)用不同濃度(0.05、

3、0.25、0.5、2.5和5 ug/ml)氟尿嘧啶脫氧核苷(FUDR)和5-氟尿嘧啶(5-FU),分別處理體外培養(yǎng)的高侵襲性絨毛膜癌細胞株JEG-3,在處理后48小時,以MTT比色法檢測兩種藥物對JEG-3細胞生長增殖的影響,計算相對生存率,比較兩種藥物抑制JEG-3細胞生長能力的差異并檢測FN蛋白表達。
　　 結果：
　　 (1)Matrigel體外侵襲實驗證實,JEG-3細胞較JAR細胞的侵襲能力明顯增強(P＜0.0

4、1):
　　 (2)在兩種細胞中均檢測到FN mRNA表達,相對低侵襲性JAR細胞,高侵襲性JEG-3細胞中FN mRNA表達明顯增加(P＜0.001),JEG-3細胞中FN蛋白表達水平較JAR細胞亦明顯增加(P＜0.05)；
　　 (3)MTT抑制實驗證實,FUDR和5-FU均對JEG-3細胞的生長能力具有抑制作用,且呈劑量依賴性。在5、2.5和0.5ug/ml藥物濃度處理下,FUDR對JEG-3細胞生長抑制能力明顯強