攜HIV-gp120 DNA的巨噬細胞對肺癌細胞的作用探究.pdf

1、暨南大學碩士學位論文題名（中英對照）：攜HIVgp120DNA的巨噬細胞對肺癌細胞的作用探究EffectofHIVgp120DNAcontainingmacrophagesonlungcancercells作者姓名：馬文心指導教師姓名王通博士副研究員及學位、職稱：何慶瑜博士教授學科、專業(yè)名稱：微生物學論文提交日期：20140415論文答辯日期：答辯委員會主席：論文評閱人：學位授予單位和日期：暨南大學碩士學位論文I摘要摘要HIV1感染者中

2、肺癌發(fā)病率顯著高于正常人，且吸煙、免疫缺陷和行為方式不是該差異主要因素。我們認為感染介導的炎癥微環(huán)境是HIV1相關肺癌（HIV1associatedlungcancerHALC）的病因機制之一。因此，我們以攜HIV1gp120的巨噬細胞（BMMgp120）與肺癌細胞A549作為體外實驗模型，初步探究上述假說。目的目的：研究BMMgp120促肺癌A549細胞的惡性進展的功能蛋白質(zhì)組轉(zhuǎn)運特征及其生物學功能驗證。方法方法：1、以整合了HIV1

3、gp120DNA的重組腺病毒和空載腺病毒感染小鼠骨髓巨噬細胞，構建BMMgp120和BMMGFP模型，并用流式細胞術，熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡技術，CBA檢測等對模型的情況進行評估。2、利用BMMgp120和BMMGFP模型分別制備其條件培養(yǎng)基，作用于肺癌細胞A549，建立HALC的一種體外研究模型。3、用SILAC技術標記BMMgp120和BMMGFP，利用生物質(zhì)譜學鑒定兩種巨噬細胞向A549細胞轉(zhuǎn)運的蛋白質(zhì)組差異。利用通路分析，

4、尋找到特征通路。并通過Westernblotting、ELISA、細胞動態(tài)分析儀和流式細胞術等多種檢測手段對轉(zhuǎn)運組學中發(fā)現(xiàn)的現(xiàn)象進行了初步生物學驗證。結果結果：1、在BMMgp120和BMMGFP的構建后評估中發(fā)現(xiàn)，BMMgp120較之BMMGFP在形態(tài)學上顯著極化，表現(xiàn)出明顯的活化特征，CBA檢測表明BMMgp120六種炎癥因子分泌也顯著高于BMMGFP，表現(xiàn)出類M2型巨噬細胞特征。2、用BMMgp120條件培養(yǎng)基所培養(yǎng)的A549細胞