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1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文血管抑素對肺癌生物學(xué)行為的影響及抑制腫瘤血管形成分子機制的研究姓名:張玲申請學(xué)位級別:博士專業(yè):病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師:楊向紅20080401與微血管密度的關(guān)系,明確其在肺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中的作用及其與臨床病理之間的關(guān)系。二、動物實驗:采用人肺癌A 5 4 9 細胞建立c 5 7 B L /6 近交系小鼠移植瘤模型進行實驗,評價A n g i o s t a t i n 治療肺癌的有效性。4 8 只荷人肺癌
2、A 5 4 9 C 5 7 B L /6 近交系小鼠( 皮下移植瘤) 分成4 組,分別皮下腫瘤內(nèi)注射A n g i o s t a t i n ( 濃度分別為0 .6 m g /K g 、1 .2m g /K g 、2 .4m g /k g ) ,對照組注射等量生理鹽水。注射次數(shù)1 次/2 d ,治療1 4 天,觀察腫瘤重量的變化;并用常規(guī)病理方法和免疫組化S .P 法檢測腫瘤組織中細胞的形態(tài)學(xué)改變和C D 3 4 、S u r v i
3、 v i n 和N F - KB 的表達,計數(shù)微血管密度( M V D ) ,觀察A n g i o s t a t i n對人肺癌小鼠移植瘤新生血管形成的影響。三、體外培養(yǎng):在體外研究中培養(yǎng)H U V E C s 和人肺癌A 5 4 9 細胞,應(yīng)用M T T 比色法檢測血管抑素對H U V E C s 和A 5 4 9 細胞增殖活性的影響,臺盼蘭染色細胞計數(shù)法觀察血管抑素對人肺癌A 5 4 9 和血管內(nèi)皮細胞生長的影響;建立腫瘤微血管
4、模型觀察血管抑素對內(nèi)皮細胞管腔形成的影響;流式細胞術(shù)分析血管抑素對H U V E C s 細胞生長周期的影響。通過蛋白印記法檢測血管抑素對人血管內(nèi)皮細胞作用的信號傳導(dǎo)途徑及其相關(guān)因子的表達,初步探討血管抑素抗新生血管形成作用的分子機制。結(jié) 果一、人體材料檢測結(jié)果:肺癌組織中A n g i o s t a t i nm R N A 表達量為5 .5 6 士1 .4 0 ,癌旁肺組織m R N A 表達量為7 .8 5 + 1 .7 4 ;
5、V E G F m R N A 表達量癌組織為1 2 .4 3 ±1 .5 8 ,癌旁組織為9 .1 0 + 1 .2 0 。組間比較差異顯著( P < o .0 5 ) ;A n g i o s t a t i nm R N A 在I .I I 期肺癌組織中表達量為9 .4 1 ±2 .2 9 ,在I I I .Ⅳ期肺癌組織中表達量為5 .2 6 - { - 2 .3 9 ,后者表達水平較前者明顯降低,差異顯
6、著( P < O .0 5 ) ;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的A n g i o s t a t i nm R N A 表達水平低于無轉(zhuǎn)移組,差異顯著( P < 0 .0 5 ) 。 V E G Fr n R N A 在I .I I 期肺癌組織中表達為9 .7 9±1 .4 5 ,在I I I .Ⅳ期肺癌組織中表達為1 6 .8 3 ±2 .3 8 ,后者表達水平明顯高于前者,差異極顯著( P ( 0 .0 1 )
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