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文檔簡介
1、本文首先以人肝臟組織RNA為模板，利用高保真酶進(jìn)行RT-PCR分別得到了血管抑制素和內(nèi)皮抑制素基因，將AS、ES片段通過Linker連接形成融合基因，構(gòu)建了原核表達(dá)質(zhì)粒pET-42(b)/AS-ES，以大腸桿菌BL21(DE3)為宿主，在IPTG的誘導(dǎo)下得到了目的蛋白的表達(dá)。通過對培養(yǎng)基、誘導(dǎo)溫度、誘導(dǎo)時間、IPTG濃度條件優(yōu)化，確定實(shí)驗(yàn)室規(guī)模下最佳表達(dá)條件為2×YT培養(yǎng)基，1.0mMIPTG，42℃誘導(dǎo)3h以上，最高表達(dá)豐度達(dá)到菌體總
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