解偶聯(lián)蛋白2在高鹽誘導的血管功能障礙中的作用.pdf

1、背景和目的:
　　 高鹽攝入與高血壓及其相關心血管疾病和靶器官損害之間的關系已經(jīng)引起社會各界的廣泛關注。大量流行病學調(diào)查顯示鹽的攝入量與血壓水平和靶器官損害呈顯著正相關,而將每日食鹽攝入量降至6g以下則能將收縮壓降低2-8mmHg。個體對鹽的敏感性存在明顯的差異,而哪些因素調(diào)控著鹽的敏感性尚不清楚,探索鹽敏感性的潛在分子機制將有可能找到鹽敏感性高血壓和血管功能障礙的防治靶點,也有利于制定限鹽治療策略的個體化方案。
　　

2、有證據(jù)表明鹽的敏感性與氧化應激(oxidative stress)反應的增強和超氧陰離子(superoxide anion)產(chǎn)生的增加密切相關。超氧陰離子淬滅具有血管保護作用的一氧化氮(nitric oxide,NO)是導致血壓升高和血管功能障礙的重要因素,這提示調(diào)控氧化應激的酶系或蛋白可能參與了高鹽誘導的血管損害。表達于線粒體內(nèi)膜上的解偶聯(lián)蛋白2(uncoupling protein2,UCP2)可通過降低氫離子跨膜勢能,從而降低氧化

3、應激和減少超氧陰離子的產(chǎn)生。也有研究報道顯示人UCP2的基因多態(tài)性與高血壓患病率增加具有顯著的相關性。這些證據(jù)提示UCP2可能與鹽誘導的高血壓和血管功能損害相關。
　　 為明確UCP2在高鹽攝入誘導的血壓升高和血管功能損害中的作用,本研究擬采用UCP2基因敲除(UCP2-/-)小鼠和野生型(WT)小鼠來研究這一問題。比較高鹽攝入對UCP2-/-小鼠和WT小鼠血壓及血管功能影響的差異,并明確血管組織中超氧陰離子的產(chǎn)生與NO的水平是

4、否與血管功能損害的程度相一致。
　　 材料與方法:
　　 將2月齡健康雄性UCP2-/-小鼠和WT小鼠分為含食鹽0.5％的正常食鹽飲食組(normal-salt diet,NS,n=12)和含食鹽8％的高鹽飲食組(high-salt diet,HS,n=12)進行飼養(yǎng),自由攝取自來水,干預24周后檢測如下指標:
　　 1、采用RT-PCR對小鼠主動脈和腸系膜阻力動脈中UCP2的mRNA進行檢測;
　　 2

5、、測量清醒小鼠的鼠尾動脈無創(chuàng)收縮壓;
　　 3、測量頸動脈介入平均血壓;
　　 4、檢測腸系膜阻力動脈對苯腎上腺素(phenylephrine,PE)、乙酰膽堿(acetylcholine,Ach)和硝酸甘油(nitroglycerin,NTG)的反應性;
　　 5、采用熒光染料Dihydroethidium(DHE)檢測主動脈組織和腸系膜阻力動脈內(nèi)膜面中的超氧陰離子水平;
　　 6、采用熒光染料DAF-

6、2DA檢測主動脈組織和腸系膜阻力動脈內(nèi)膜面中的NO水平。
　　 結(jié)果:
　　 1、WT鼠主動脈和腸系膜阻力動脈組織均有UCP2的mRNA表達,而在UCP2-/-小鼠中則未檢測到UCP2的mRNA表達。
　　 2、WT小鼠HS組的鼠尾動脈收縮壓與NS組無顯著差異,而UCP2-/-小鼠HS組的鼠尾動脈收縮壓顯著高于NS組(P＜0.01)。WT小鼠HS組的頸動脈介入平均血壓與NS組亦無顯著差異,而UCP2-/-小鼠HS

7、組的頸動脈介入平均血壓顯著高于NS組(P＜0.01)。
　　 3、WT小鼠HS組的腸系膜阻力動脈對PE誘導的收縮反應顯著強于NS組(P＜0.01),對Ach誘導的舒張反應顯著弱于NS組(P＜0.01);而在UCP2-/-小鼠中,高鹽誘導的腸系膜阻力動脈對PE誘導的收縮反應的增強被進一步加強(P＜0.01),而對Ach誘導的舒張反應的減弱也被進一步減弱(P＜0.01)。各組間血管對Ach誘導的舒張反應的差異在加用eNOS抑制劑L-

8、NAME后則完全消失。各組小鼠腸系膜阻力動脈對NTG誘導的舒張反應均沒有顯著差異。
　　 4、WT小鼠HS組的主動脈和腸系膜阻力動脈中超氧陰離子的水平顯著高于NS組(P＜0.05),而NO的水平則顯著低于NS組(P＜0.05);而在UCP2-/-小鼠中,高鹽誘導的主動脈和腸系膜阻力動脈中超氧陰離子產(chǎn)生的增加均被進一步加強(P＜0.01),而NO的水平的降低也更加顯著(分別為P＜0.01和P＜0.05)。
　　 結(jié)論: