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文檔簡介
1、目的:
1建立穩(wěn)定、簡單、經(jīng)濟(jì)、適用的抗肝癌治療篩選模型。
2研究大腸桿菌E.coli44104抗瘤內(nèi)抗癌效果。
方法:
1采用隧道種植法建立小鼠S180和倉鼠pGHAM-1移植性肝癌模型。第一步:復(fù)蘇腫瘤細(xì)胞離心濃縮后接種到實(shí)驗(yàn)動物右前肢腋窩皮下;第二步:待皮下腫瘤長到2cm左右,取出腫瘤組織,立即冰浴在生理鹽水中,選取生長旺盛部分,制成直徑0.1-0.2cm的腫瘤組織小塊;第三步:于無菌條件下
2、,經(jīng)手術(shù)將瘤塊接種到動物肝臟左前葉;第四步:通過定期測量腫瘤大小和病理學(xué)檢測,研究腫瘤的生物學(xué)特性。統(tǒng)計(jì)分析模型動物的生存期。
2將移植性肝癌模型動物隨機(jī)分成高,中,低三個實(shí)驗(yàn)組和對照組。沿腹正中切口進(jìn)入荷瘤動物腹腔,顯露腫瘤并測量大小。按組別將大腸桿菌E.coli44104菌液或等量生理鹽水注射入模型動物腫瘤內(nèi)。在E.coli44104對移植性肝癌模型腫瘤生長的影響實(shí)驗(yàn)中,于干預(yù)后第10天處死全部實(shí)驗(yàn)動物,取出腫瘤測量并記錄
3、大小,并對各組腫瘤進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察。在E.coli44104對移植性肝癌模型動物生存期的影響實(shí)驗(yàn)中,于干預(yù)后第三天開始記錄各組實(shí)驗(yàn)動物死亡時間,持續(xù)3個月。最后對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,比較各實(shí)驗(yàn)組與對照組腫瘤的大小和抑制率以及組織形態(tài)學(xué)變化,比較各實(shí)驗(yàn)組和對照組荷瘤動物的生存期,得出結(jié)論并對其機(jī)理進(jìn)行探討。
結(jié)果:
1小鼠 S180移植性肝癌模型成功率達(dá)97.5%。倉鼠模型成功率達(dá)100%。腫瘤生長迅速,于肝內(nèi)呈結(jié)
4、節(jié)狀浸潤性生長,切面灰白、實(shí)性,境界不清,晚期出現(xiàn)轉(zhuǎn)移及腹水。
2大腸桿菌E.coli44104各劑量組腫瘤大小和抑制率以及荷瘤動物生存期相對對照組均有差別,其中中劑量組能顯著抑制腫瘤生長,延長荷瘤動物生存期。病理切片可見干預(yù)后腫瘤內(nèi)出現(xiàn)大腸桿菌聚集,腫瘤組織大面積壞死化膿。
結(jié)論:
1成功建立了小鼠S180和倉鼠pGHAM-1移植性肝癌模型,為抗腫瘤研究提供了兩種廉價(jià)易操作的新模型。
2大腸桿菌
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