姜黃素對慢性阻塞性肺疾病患者外周血來源的內(nèi)皮祖細胞數(shù)量及功能的影響.pdf

1、背景：
　　慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一種慢性氣道炎癥性疾病,目前在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率和死亡率逐年增加,是當(dāng)今嚴重的全球性公共衛(wèi)生問題。根據(jù)WTO統(tǒng)計資料顯示,COPD已成為全球第4位死亡原因,預(yù)計2020年將躍居為全球范圍內(nèi)死亡原因的第3位,僅次于缺血性心臟病及腦血管病,進一步加重全球的社會經(jīng)濟負擔(dān)。隨著病情的進展,COPD患者不僅存在肺功能的逐漸下

2、降,同時還伴隨著心血管系統(tǒng)疾病,骨質(zhì)疏松,抑郁等合并癥的發(fā)生,嚴重影響患者的生活質(zhì)量。由于COPD的發(fā)病機制尚未完全闡明,因此深入地探討COPD的發(fā)病機制,從根本上預(yù)防和治療COPD是當(dāng)今全球的研究熱點。COPD患者早在發(fā)病初期就存在著血管內(nèi)皮功能的受損,內(nèi)皮功能障礙在COPD的發(fā)生及發(fā)展中起著重要作用。內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)作為內(nèi)皮細胞的前體細胞,當(dāng)血管內(nèi)皮受損后可通過EPCs

3、分化為成熟內(nèi)皮細胞參與修復(fù)損傷的內(nèi)皮,對于維持內(nèi)皮功能完整和血管新生具有重要意義。近年來有研究證實姜黃素能顯著增加人外周血EPCs的數(shù)量并改善其內(nèi)皮修復(fù)功能,提示姜黃素對修復(fù)內(nèi)皮損傷具有重要作用。然而,姜黃素對COPD患者的內(nèi)皮損傷是否具有修復(fù)作用,其可能的作用機理如何,目前國內(nèi)外尚未見相關(guān)研究及報道。
　　目的：
　　觀察不同濃度姜黃素對COPD患者外周血來源的EPCs的數(shù)量、增殖功能、一氧化氮(nitric oxide,

4、NO)分泌功能及內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表達的影響,探討姜黃素對COPD患者血管內(nèi)皮功能保護作用的機制。
　　方法：
　　選擇住院的COPD病人30例,分別抽取外周血15mL,經(jīng)密度梯度離心法獲取各自外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),均分為4組,加入不同濃度姜黃素(0,5,10,15μm

5、ol/L)刺激并誘導(dǎo)其分化為EPCs,熒光雙染色鑒定EPCs后進行細胞計數(shù)。消化收集貼壁的EPCs,再加入各濃度姜黃素,相同條件下培養(yǎng)一定時間(6,12,24,48h)。采用CCK-8法檢測EPCs的增殖能力,硝酸還原酶法(Griess法)檢測NO分泌量,Western Blot法檢測eNOS蛋白的表達。結(jié)果
　　與未加入姜黃素的對照組相比,姜黃素可以促進PBMC向EPCs的分化率,從而增加了EPCs的數(shù)量。隨著姜黃素濃度增加,E

6、PCs數(shù)量增加越明顯,當(dāng)姜黃素濃度為15μmol/L時到達高峰(P<0.01)。姜黃素也顯著改善了COPD患者EPCs的自身增殖功能及NO分泌功能,呈濃度及時間依賴關(guān)系,與15μmol/L濃度的姜黃素共培養(yǎng)24h后,EPCs的增殖及NO分泌功能改善最為明顯(P<0.01)。姜黃素刺激后,EPCs的eNOS表達也顯著上調(diào),且呈濃度依賴關(guān)系,當(dāng)姜黃素濃度為15μmol/L時上調(diào)最為明顯(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　姜黃素可