CIA大鼠炎癥網(wǎng)絡(luò)因子與易栓狀態(tài)關(guān)系實驗研究及中藥干預(yù).pdf

1、目的： 為了探討炎癥網(wǎng)絡(luò)因子對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)免疫炎性血管病變的致病作用與易栓狀態(tài)關(guān)系，課題建立了以Ⅱ型膠原誘導(dǎo)的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(collagen type Ⅱ-induced arthritis，CIA鼠模型，研究CIA大鼠炎癥網(wǎng)絡(luò)與易栓狀態(tài)關(guān)系，并觀察中藥丹參、小檗堿的干預(yù)作用。 方法： 以Ⅱ型膠原和完全弗氏佐劑(complete Freund's Adjuva

2、nt，CFA)共同建立CIA大鼠模型。藥物組共分5組均于初次免疫次日灌胃給藥；CIA模型組每天灌服1.5ml蒸餾水；正常對照組自由飲水。各組大鼠每周進行一次AI評分，于第35天心臟采血，分離血清，予酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測各組大鼠血清IL-6、D-D水平，Western Blot法檢測MMP-9的表達并計算相對含量；處死大鼠后取膝關(guān)節(jié)進行常規(guī)病理和免疫組織化學(xué)檢測滑膜CD40。 結(jié)果： 1、Ⅱ型膠原和完全弗氏佐

3、劑誘導(dǎo)大鼠關(guān)節(jié)炎癥狀，成功復(fù)制出RA動物模型，CIA．大鼠出現(xiàn)明顯的局部持續(xù)關(guān)節(jié)腫脹、關(guān)節(jié)活動障礙等臨床表現(xiàn)。組織病理學(xué)可見滑膜增厚，大量炎癥細胞呈彌漫性或局限性浸潤，纖維組織增生。 2、CIA大鼠血清IL-6、MMP-9、D-D水平明顯增高于正常對照組(P<0.05)，關(guān)節(jié)滑膜CD40表達明顯增加(P<0.05)；各藥物組上述指標(biāo)較模型組有不同程度的減少，AI評分也相應(yīng)降低。 3、藥物組大鼠血清IL-6、MMP-9、D

4、-D水平明顯低于模型組和單用小檗堿組(P<0.05)，滑膜CD40表達明顯降低(P<0.05)，關(guān)節(jié)癥狀好轉(zhuǎn)，AI評分也相應(yīng)變化，丹參+MTX組的上述指標(biāo)明顯低于MTX組、丹參組、小檗堿+MTX組(P<0.05)。 4、小檗堿+MTX組與模型組比較，血清IL-6、MMP-9、D-D水平及滑膜CD40表達均有所下降(P<0.05)，關(guān)節(jié)癥狀相應(yīng)好轉(zhuǎn)。單用小檗堿組比較模型組，對上述指標(biāo)有一定影響，但未出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

5、 結(jié)論： 1、CIA大鼠發(fā)病過程中炎癥網(wǎng)絡(luò)因子釋放增高，參與形成RA的免疫性關(guān)節(jié)和滑膜病變的病理過程，是促進RA發(fā)生易栓狀態(tài)或肢端局部血栓形成的病理基礎(chǔ)。 2、中藥丹參聯(lián)合MTX治療改變相關(guān)指標(biāo)療效顯著優(yōu)于兩藥單用組。提示丹參有協(xié)同MTX的抗免疫炎性作用，可使炎癥網(wǎng)絡(luò)因子水平降低，改善免疫炎性所致的易栓狀態(tài)。 3、小檗堿與MTX聯(lián)合用藥對抑制CIA大鼠炎癥網(wǎng)絡(luò)因子有一定的作用，但低于丹參聯(lián)合MTX治療組。