復(fù)合型AD大鼠模型炎癥因子、Trx與神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)系研究.pdf

1、目的：建立一種復(fù)合型阿爾茨海默病(Alzheimer‘s disease，AD)動(dòng)物模型。在此基礎(chǔ)上觀察復(fù)合型AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，檢測(cè)復(fù)合型AD模型大鼠炎癥因子的表達(dá)，探討炎癥因子與AD發(fā)病機(jī)理中的相關(guān)性，以及AD模型鼠腦中硫氧還蛋白的表達(dá)與神經(jīng)細(xì)胞凋亡通路的關(guān)系，為AD的的發(fā)病機(jī)制、臨床防治等提供新的科學(xué)理論依據(jù)。
　　方法：
　?。?）復(fù)合型AD大鼠模型的建立實(shí)驗(yàn)分組：對(duì)照組（A組）和模型組（B組）。采用腹腔注射

2、 D-半乳糖聯(lián)合側(cè)腦室注射 Aβ1-42建立復(fù)合型 AD模型組；選用正常大鼠作為對(duì)照組。
　?。?）行為學(xué)檢測(cè)采用Morris水迷宮檢測(cè)兩組大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力；
　　（3）形態(tài)學(xué)的觀察蘇木精—伊紅染色法( hematoxylin-eosin staining，HE染色)觀察神經(jīng)元形態(tài)及數(shù)量的變化；
　?。?）病理特征的觀察觀察Tau蛋白數(shù)量的變化；
　?。?）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme linked immu

3、nosorbent assay，ELISA）檢測(cè)大鼠大腦皮質(zhì)、紋狀體、海馬、小腦以及牙周組織相關(guān)炎癥因子（CRP，IL-1β，IL-6和TNF-α）的測(cè)定。
　?。?）免疫組織化學(xué)檢測(cè)腦組織各區(qū)Trx的表達(dá)。
　?。?）western blotting檢測(cè)細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases，ERK)和p38MAPK的檢測(cè)；
　?。?）生物信息驗(yàn)證AD中Tr

4、x與MAPK信號(hào)通路之間的關(guān)系。結(jié)果：
　?。?）Morris水迷宮檢測(cè)顯示：與對(duì)照組相比，模型組大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力明顯下降，有顯著性差異（P<0.01）；
　　（2）HE染色結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，模型組染色神經(jīng)元的數(shù)量有相當(dāng)程度的減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），同時(shí)，模型組神經(jīng)元可見核固縮、胞體變小等形態(tài)學(xué)改變；
　?。?）免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，模型組的Tau蛋白表達(dá)明顯增加；
　

5、?。?）ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示：模型組皮質(zhì)、海馬、血清以及牙周組織中，相關(guān)炎癥因子（CRP，IL-1β，IL-6和 TNF-α）的表達(dá)顯著增加，與對(duì)照組相應(yīng)指標(biāo)相比都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），而兩組在紋狀體、小腦中的炎癥因子表達(dá)差異不明顯或者不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　?。?）模型組中的Trx，ERK、p38MAPK表達(dá)水平和對(duì)照組相比有差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；生物信息驗(yàn)證了它們之間具有調(diào)控關(guān)系。
　　結(jié)論：

6、r>　?。?）較好的在衰老的基礎(chǔ)上建立了一種AD復(fù)合動(dòng)物模型，初步探討了衰老與AD之間存在的潛在關(guān)系。
　?。?）在D-半乳糖亞急性衰老模型基礎(chǔ)上可建立Aβ1-42復(fù)合式AD動(dòng)物模型。這種復(fù)合式動(dòng)物模型不僅能在行為學(xué)，生化指標(biāo)及組織學(xué)上較好地模擬 AD病理特征，用于老年癡呆的基礎(chǔ)研究，而且也可用于探討老年癡呆的防治途徑。
　?。?）D-半乳糖聯(lián)合Aβ1-42建立的復(fù)合型AD大鼠模型中，相關(guān)炎癥因子（CRP， IL-1β，IL