胸腺類癌引起的異位ACTH綜合征的發(fā)病機制研究.pdf

1、目的：研究導(dǎo)致異位ACTH綜合征的胸腺類癌組織與正常胸腺組織的基因表達(dá)差異，探討胸腺類癌引起異位ACTH綜合征的可能機制，尋求有效的藥物靶點和生物標(biāo)記物。 方法：收集經(jīng)手術(shù)病理證實的導(dǎo)致異位ACTH綜合征的胸腺類癌組織，分別提取胸腺類癌組織嶼正常對照胸腺組織的RNA樣本，以不同的熒光cy-3和Cy-5標(biāo)記，運用cDNA微陣列雜交技術(shù)，將腫瘤和對照RNA樣本與芯片雜交，芯片數(shù)據(jù)通過Lowess回歸分析進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化后，再使用自組織映射

2、聚類(Self-Organizing Map，SOM)進(jìn)行聚類分析，選擇重要基因經(jīng)RT-PCR和western驗證，然后利用GO(Gene Oncology)給予基因或基因產(chǎn)物功能注釋，最后通過Biocarta，KEGG等信號傳導(dǎo)數(shù)據(jù)庫對胸腺類癌發(fā)病過程中的相關(guān)通路進(jìn)行分析總結(jié)。 結(jié)果在10647個研究基因中，胸腺類癌與正常胸腺組織顯著差異表達(dá)的基因有2836個，其中差異倍數(shù)大于1.5倍的基因2394個，功能涉及細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞防

3、御、基因表達(dá)、代謝、蛋白合成、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等。選取POMC、PAK3和N-cadherin等基因，經(jīng)RT-PCR和Western Blot驗證結(jié)果與微陣列雜交結(jié)果一致。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)多種參與生物學(xué)過程、分子功能及細(xì)胞組成的基因均與胸腺類癌導(dǎo)致異位ACTH綜合征的發(fā)病有關(guān)。 結(jié)論 異位ACTH綜合征是胸腺組織發(fā)生多種基因表達(dá)異常導(dǎo)致的，涉及多種生物學(xué)過程異常。這些異常表達(dá)的基因，可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和凋亡，參與了胸腺類癌的發(fā)生發(fā)