原料乳中酪蛋白快速檢測技術(shù).pdf

1、酪蛋白是牛乳中的主要蛋白質(zhì)，含量相對穩(wěn)定，因此可以利用原料奶中酪蛋白含量作為評定原料奶質(zhì)量和判定原料奶是否摻假的一個(gè)指標(biāo)。本研究選取含量較為穩(wěn)定的αs-和κ-酪蛋白制備多克隆抗血清，研制檢測原料奶中兩種酪蛋白含量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1、用αs-酪蛋白和κ-酪蛋白作為免疫原免疫新西蘭白兔，制得的抗體用間接ELISA檢測效價(jià)，結(jié)果表明：第六次加強(qiáng)免疫后，即可獲得較高效價(jià)的多克隆抗體，其效價(jià)分別為1∶1600和1∶3

2、200。 2、間接ELISA分析了抗體的特異性，兩種抗體的特異性較好，它們與乳中其它蛋白交叉反應(yīng)很小。 3、用間接ELISA優(yōu)化了包被抗原及抗血清的最佳工作濃度：αs-和κ-酪蛋白包被濃度分別為600ng/ml和200ng/ml，αs-和κ-酪蛋白抗血清工作濃度分別為1∶160和1∶640。確定了抗原包被的溫度和時(shí)間：37℃，2h。 4、初步建立了原料奶中αs-和κ-酪蛋白的檢測方法。αs-酪蛋白檢測的線性范圍是

3、25～1200ng/ml，相關(guān)系數(shù)為0.9825，回收率在91.97％～115.61％之間；κ-酪蛋白檢測的線性范圍是25～1400ng/ml，相關(guān)系數(shù)是0.9831，回收率在95.83％～125.83％之間。用建立的間接ELISA檢測樣品中的酪蛋白含量，并與用FOSSFT120乳成分分析儀檢測結(jié)果進(jìn)行確證，準(zhǔn)確度均達(dá)到90％以上。 本實(shí)驗(yàn)所建立的檢測牛乳中α、-和κ-酪蛋白含量的方法，具有特異性強(qiáng)，操作簡單，技術(shù)條件低等特點(diǎn)，