固定化胰蛋白酶酶解酪蛋白產(chǎn)生酪蛋白磷酸肽的條件研究.pdf

1、酪蛋白是乳中含量最豐富的蛋白質(zhì)，含有人體生長(zhǎng)發(fā)育所必需的氨基酸。近年來(lái)的研究結(jié)果表明，酪蛋白除具有營(yíng)養(yǎng)功能之外，還具有非常重要的生理功能，是生物活性肽的重要來(lái)源。其中酪蛋白磷酸肽在動(dòng)物的小腸環(huán)境中能防止二價(jià)金屬離子產(chǎn)生沉淀，增加腸內(nèi)可溶性礦物質(zhì)的濃度，從而促進(jìn)腸黏膜對(duì)鈣、鐵、鋅、硒的吸收和利用，尤其是鈣的吸收和利用，被譽(yù)為“礦物質(zhì)載體”。酪蛋白磷酸肽是目前唯一一種促進(jìn)鈣吸收的活性肽，同時(shí)對(duì)提高機(jī)體免疫力、改善繁殖性能等方面也有重要作用。

2、 研究了胰蛋白酶的固定化條件，以殼聚糖為載體，戊二醛為交聯(lián)劑，采用交聯(lián)．吸附法對(duì)胰蛋白酶進(jìn)行固定化。分析了酶用量、戊二醛濃度、pH值、溫度、交聯(lián)時(shí)間以及吸附時(shí)間等因素對(duì)固定化酶活力和活力回收率的影響。從中選擇較顯著的四個(gè)因素進(jìn)行L9（34）正交實(shí)驗(yàn)，以酶活力為指標(biāo)，對(duì)胰蛋白酶的固定化條件進(jìn)行優(yōu)化，以獲得固定化的最佳反應(yīng)條件。 殼聚糖固定化胰蛋白酶，最佳固定化條件為：酶用量14mg，戊二醛濃度0．2％，pH值7．5，溫度3

3、5℃，交聯(lián)時(shí)間2h，吸附時(shí)間5h。在最佳固定化條件下制得的固定化酶活性為397．29U，活力回收率達(dá)76．57％。 用制備好的固定化酶裝柱進(jìn)行連續(xù)水解制備酪蛋白磷酸肽，以水解液的△pH值和N/P為實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，重點(diǎn)討論了酶裝柱水解過(guò)程中pH值、底物濃度、溫度、底物流速等因素的最佳作用條件。固定化酶裝柱水解最佳作用條件為：溫度60℃，底物濃度4％，pH值為9．0，恒流泵轉(zhuǎn)速為20r/min。 利用交聯(lián)葡聚糖（Sephadex