正畸力影響OVA致敏大鼠牙周組織RANKL、CK表達(dá)變化的研究.pdf

1、目的:
　　構(gòu)建正畸力作用下大鼠卵清蛋白(ovalbumin，OVA)致敏模型;觀察不同時(shí)間點(diǎn)OVA致敏大鼠與正常大鼠正畸牙移動(dòng)壓力側(cè)牙周組織和牙根的形態(tài)學(xué)變化;檢測(cè)牙周組織中破骨細(xì)胞(osteoclast，0C)、核因子-κB受體活化因子配體(receptor activator of nuclear factor kappa Bligand，RANKL)和組織蛋白酶K(cathepsin K，CK)的表達(dá)及變化規(guī)律;探討OVA

2、致敏因素是否對(duì)正畸牙移動(dòng)牙周組織改建存在影響。
　　方法:
　　選取40只8周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為兩組:致敏組(T1)大鼠于第1、7天各腹腔注射1ml OVA致敏液，第14天腹腔注射1ml OVA激發(fā)液。非致敏組(T2)大鼠在相同時(shí)間各腹腔注射1ml生理鹽水，設(shè)為加力對(duì)照組。在第15天，兩組大鼠經(jīng)麻醉后內(nèi)眥取血并分離血清，ELISA法定性測(cè)定血清0VAsIgE，確認(rèn)OVA致敏模型建立成功后再建立正畸牙移動(dòng)模型:將NiTi拉

3、簧固定于左側(cè)(L)上頜第一磨牙，以兩顆上切牙為支抗，40g力近中牽引第一磨牙，右側(cè)(R)上頜第一磨牙設(shè)為非加力對(duì)照。兩組大鼠于加力后第1、3、5、7、14天處死并制作標(biāo)本，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各處死4只。模型測(cè)量左側(cè)上頜第一磨牙近中牙移動(dòng)距離。HE染色觀察牙周組織和牙根的形態(tài)學(xué)變化。TRAP染色計(jì)數(shù)上頜第一磨牙壓力側(cè)破骨細(xì)胞數(shù)量。通過(guò)免疫組織化學(xué)染色法觀察牙周組織中RANKL和CK的表達(dá)變化，應(yīng)用Image-pro-plus6.0圖像分析系統(tǒng)對(duì)R

4、ANKL、CK含量進(jìn)行半定量分析。采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件、GraphPad Prism5.0繪圖軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和處理。
　　結(jié)果:
　　(1)成功建立大鼠OVA致敏模型和正畸牙移動(dòng)模型。
　　(2)牙移動(dòng)距離:T1L與T2L兩加力組牙移動(dòng)規(guī)律與經(jīng)典牙移動(dòng)規(guī)律相似，但在第二期出現(xiàn)少量回彈。組間比較顯示第3天T1L組牙移動(dòng)距離大于T2L組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。其余時(shí)間點(diǎn)移動(dòng)距離雖然存在差異，但無(wú)

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(3) HE染色:T1L與T2L兩加力組在40g持續(xù)正畸力下牙周組織壓力側(cè)出現(xiàn)規(guī)律的組織改建及骨吸收變化。第1、3、5天組織變化表現(xiàn)為骨吸收，第7天后骨吸收現(xiàn)象逐漸減少，第14天牙周組織開始修復(fù)。
　　(4) TRAP染色:加力早期，T1L與T2L兩加力組成熟破骨細(xì)胞數(shù)量存在時(shí)間依賴性，在第5天到達(dá)高峰，加力后期細(xì)胞數(shù)量逐漸減少。各時(shí)間點(diǎn)T1L組破骨細(xì)胞數(shù)量均高于T2L組，但僅在第3、7、1

6、4天 時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　(5)免疫組織化學(xué)染色:T1L與T2L兩加力組RANKL和CK的表達(dá)水平隨加力時(shí)間延長(zhǎng)呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，各時(shí)間點(diǎn)T1L組的表達(dá)水平均高于T2L組。RANKL和CK表達(dá)的差異分別在第3、14天和第5、7天具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩加力組RANKL和CK的表達(dá)呈現(xiàn)顯著正相關(guān)關(guān)系(P＜0.000)。
　　結(jié)論:
　　與正常大鼠相比，各時(shí)間點(diǎn)OVA致敏大鼠牙周組織