酵母酒精發(fā)酵相關(guān)基因克隆表達條件優(yōu)化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文從二倍體釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工業(yè)菌株出發(fā),用McClary培養(yǎng)基,經(jīng)25℃、7天的產(chǎn)孢培養(yǎng),對ZJD3系列二倍體菌株進行單倍體分離,獲得單倍體71株。對篩選所得單倍體菌株進行交配型鑒定和發(fā)酵性能測定,得交配型a的菌株30株,交配型a的菌株18株。從中篩選獲得發(fā)酵性能較優(yōu)的單倍體菌株4株,其中a型1株,α型3株,分別為:zs-11(a,ZJD3-7)、zs-5(α,ZJD3-3)、zs-13(α

2、,ZJD3-7)、zs-14(α,ZJD3-11),乙醇產(chǎn)率均比各自的親株提高3％以上。 后運用基因工程從變異鏈球菌(Streptococcus mutans)中克隆編碼3-磷酸甘油醛脫氫酶的gapN基因,并在質(zhì)粒pUG36和pDB20基礎(chǔ)上構(gòu)建重組質(zhì)粒pUG36-gapN和pDB20-gapN。敲除選育所得的高產(chǎn)釀酒酵母單倍體zs-11(a,ZJD3-7)菌株的URA3基因,并將上述重組質(zhì)粒分別引入URA3敲除的該菌株中,驗證

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