小劑量放射治療對比格犬脊髓損傷后反應性膠質增生的影響和機制研究.pdf

1、目的:星形膠質細胞在脊髓損傷(spinalcordinjury,SCI)后被大量激活并釋放多種致炎因子而加重機體的炎性損傷,促進神經(jīng)元的凋亡。由于星形膠質細胞為可分裂細胞,其活化增殖受著細胞周期的密切調控。本研究試圖探討小劑量放射治療對脊髓損傷后星形膠質細胞的活化增殖及相關炎癥反應的影響,為細胞周期調控在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Centralnervoussystem,CNS)的進一步研究應用提供實驗依據(jù)。
　　方法:實驗動物分為假手術組、

2、脊髓損傷組和小劑量放射治療組,建立脊髓半切損傷模型,分別于損傷后3d、6d、14d、30d和60d處死,剝離受損段脊髓并計算組織含水量,利用免疫組織化學技術檢測脊髓損傷后星形膠質細胞的活化增殖情況,利用westernblot技術檢測星形膠質細胞增殖相關蛋白GFAP、Ki67的表達水平變化,利用流式細胞術檢測星形膠質細胞細胞周期的變化,利用TUNEL技術檢測神經(jīng)元凋亡變化,利用尼氏染色計數(shù)脊髓灰質前角運動神經(jīng)元數(shù)目。
　　結果:假手

3、術組中星形膠質細胞多處于靜息狀態(tài)(胞體纖細,突起細長),僅見零星散在的Ki67陽性星形膠質細胞,星形膠質細胞增殖相關蛋白(GFAP和Ki67)的表達較弱,89±5.68％的星形膠質細胞處于G0/G1期,5±0.85%處于S期,5±1.67%處于G2/M期,神經(jīng)元凋亡數(shù)目少,脊髓前角運動神經(jīng)元計數(shù)53±2.35%;脊髓損傷組Ki67陽性星形膠質細胞密度20±9.82%,星形膠質細胞增殖相關蛋白(GFAP和Ki67)的表達增強,72±5.6

4、8%的星形膠質細胞處于G0/G1期,18±1.02%處于S期,9±2.44%處于G2/M期,脊髓組織水腫明顯,含水量可達75±8.99%,神經(jīng)元凋亡數(shù)目增多,脊髓前角運動神經(jīng)元計數(shù)20±2.00%;給予小劑量放射治療后可以抑制星形膠質細胞活化增殖,Ki67陽性星形膠質細胞密度5±2.42%,星形膠質細胞增殖相關蛋白(GFAP和Ki67)的表達增強,85±3.54%的星形膠質細胞處于G0/G1期,6±0.99%處于S期,6±0.82%處于