脫氧雪腐鐮刀烯醇超微量免疫檢測法的建立.pdf

1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol，DON)污染糧食作物的現(xiàn)象非常普遍，廣泛存在于大麥、玉米、小麥等農(nóng)作物。目前，世界范圍內(nèi)DON污染居各種生物毒素之首，屬于嚴重污染。本研究主要目的采用時間分辨熒光免疫分析(Time-resolvedfluoroimmunoassay，TRFIA)技術建立檢測DON高靈敏的分析技術。論文的主體部包括以Eu3+為標記物建立DON-TRFIA免疫檢測法及Eu3+/Sm3+為標記物建立DON/Z

2、EN雙標記TRFIA。首先建立DON-TRFIA免疫檢測法并對其進行嚴格的考核。DON-TRFIA靈敏度為0.01ng/mL，檢測范圍為0.01～100ng/mL，批內(nèi)、批間變異率均<10%。不同樣品的添加回收率符合免疫分析方法平均回收率在70%～130%之間。玉米樣品檢測結果表明DON-TRFIA與商品化DON-ELISA試劑盒結果高度相關。在DON-TRFIA工作的基礎上，以Eu3+/Sm3+為標記物建立了快速、靈敏、可靠的DON/

3、ZEN雙標記TRFIA。雙標記DON/ZEN-TRFIA的靈敏度為:DON為0.194ng/mL、ZEN為0.73ng/mL。測量范圍為:DON0.194～100ng/mL、ZEN0.73～50ng/mL。最后初步建立了DON光激化學發(fā)光免疫檢測法(DON-LICLIA)，并簡要的考核DON-LICLIA的穩(wěn)定性、樣品添加回收率等。DON-LICLIA兩步共30min的反應模式縮短了檢測時間，批內(nèi)批間變異率均<5%。檢測范圍為0.007