脫氧雪腐鐮刀菌烯醇膠體金檢測試紙條的研制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)是一種常見的霉菌毒素,世界各國普遍存在污染,在我國糧食谷物中其含量超標情況嚴重?,F(xiàn)階段DON的檢測技術(shù)中TLC、ELISA、HPLC等方法雖然能定量分析,但其操作繁瑣、不能實現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測,而實驗研制的膠體金免疫試紙條使用更為方便,適合大批樣品的快速檢測。
  本論文對比了抗壞血酸和檸檬酸三鈉兩種方法制備的膠體金溶液,因抗壞血酸法制備的金顆粒不易保存、穩(wěn)定性差,最終選用2 mL濃度為1%的檸檬酸三鈉來還

2、原0.01%氯金酸,制備的金顆粒粒徑約為17 nm左右。通過不斷優(yōu)化,實驗確定1 mL膠體金溶液中添加0.1 mol/L K2CO3溶液17μL,DON抗體5μg,穩(wěn)定劑選擇先加100μL1%PEG,再加入10%BSA100μL,離心純化完后底部沉淀用PBS重懸,金標抗體用復溶液稀釋5倍,檢測線和質(zhì)控線上分別包被0.4 mg/mL的DON-BSA和0.6 mg/mL的羊抗鼠IgG,NC膜型號為CN140,在37℃條件下干燥4小時,包被液

3、0.01 mol/L pH7.4 PBS(5%蔗糖,5%甲醇)中加入0.085μL/μL的10%NaCl來增強顯色效果。樣品墊型號為GL-b03,金標墊型號為GL0194。樣品墊處理液為0.01 mol/L pH7.4 PBS(5%蔗糖,1%BSA,0.1%吐溫-20),金標墊處理液和金標復溶液均為0.01 mol/L pH7.4 PBS(7%蔗糖,1%BSA,0.4%PVP,1%海藻糖)。
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