中囊病病毒免疫膠體金檢測試紙條研制.pdf

1、蜜蜂囊狀幼蟲病是由囊狀幼蟲病病毒(Sacbrood virus，SBV)引起的一類蜜蜂傳染病，而感染中華蜜蜂的囊狀幼蟲病病毒則被稱為中華蜜蜂囊狀幼蟲病病毒，簡稱中囊病病毒(Chinese Sacbrood virus，CSBV)。囊狀幼蟲病對中華蜜蜂的危害尤其嚴重，感病幼蟲的死亡率很高，且其對成年蜜蜂的采集及哺育行為也有一定影響。但目前沒有適用于生產實踐的檢測方法。
　　本研究以中囊病病毒江西株為研究對象，通過克隆獲得了中囊病病毒

2、江西分離株結構蛋白基因vp1、vp3的核苷酸及氨基酸序列，分析了SBV的系統(tǒng)進化關系;并且，對CSBV江西株的vp3基因進行了原核表達，在此基礎上制備了CSBV江西株vp3單克隆抗體;同時，以CSBV江西株vp1基因的氨基酸序列為依據，設計并合成了多肽抗原，并以此作為抗原制各了CSBV江西株vp1多克隆抗體;最后，以制得的單抗與多抗為基礎，結合雙抗體夾心法，采用膠體金免疫層析技術初步研制了中囊病膠體金檢測試紙條。主要結果有:
　　

3、1.克隆得到的CSBV江西株vp1基因核苷酸序列大小為973 bp，編碼324個氨基酸;vp3基因核苷酸序列大小為1070 bp，編碼356個氨基酸。
　　2.CSBV江西株vp1、vp3基因序列分析表明:CSBV江西株vp1基因與其它分離株的相似性較vp3基因低，這說明vp3基因較為保守;基于SBV全基因組、vp1基因以及SBV基因保守區(qū)段進行分析，并推斷:SBV病毒株的宿主特異性及其地理分布差異都決定著其遺傳多樣性，且東、西方