紫杉木霉木霉菌素生物合成相關基因及Tri3基因對木霉素合成的影響.pdf

1、紫杉木霉（Trichoderma taxi）是從南方紅豆杉分離的一種內生真菌，它可以產(chǎn)生具有抑菌活性的物質木霉菌素(trichodermin)。木霉菌素能有效地抑制立枯絲核菌、灰葡萄孢等病原真菌的生長，并具有開發(fā)為生物農(nóng)藥的應用前景。在木霉菌素的發(fā)酵過程中，木霉菌素產(chǎn)量于發(fā)酵前期隨時間增加而不斷上升，但在發(fā)酵后期產(chǎn)量反而下降。本研究目的是解析紫杉木霉中木霉菌素的生物合成途徑及生物合成相關基因，通過基因改造獲得紫杉木霉工程菌株，突破木霉菌

2、素發(fā)酵瓶頸，達到木霉菌素的高產(chǎn)。
　　根據(jù)紫杉木霉基因組測序結果，紫杉木霉中木霉菌素生物合成相關的七個基因Tri3、Tri4、Tri6、Tri10、Tri11、Tri12、Tri14形成一個基因簇。紫杉木霉與葦狀木霉（T.arundinaceum）、短密木霉（T.brevicompactum）、擬枝孢鐮刀菌（Fusarium sporotrichioides）和禾谷鐮刀菌（Fgraminearum）的Tri基因同源性很高，其編碼起

3、始位點、編碼序列的大小都非常相似。
　　葦狀木霉的Tri3基因可能編碼了木霉菌醇(trichodermol)C-4位乙酰化反應生成哈茨木霉素（harzianumA）所需的酶。由于紫杉木霉Tri3基因與葦狀木霉的Tri3基因同源性很高，推測紫杉木霉的Tri3基因可能編碼木霉菌醇C-4位乙?；磻赡久咕氐拿浮＠棉r(nóng)桿菌介導的ATMT方法敲除紫杉木霉Tri3基因得到敲除突變體，與野生型相比，突變體發(fā)酵液中木霉菌素濃度大幅減小、木霉

4、菌醇濃度沒有明顯變化;突變體發(fā)酵液活性降低，對病原真菌的抑制性降低。因此，推測Tri3基因與木霉菌醇生成木霉菌素過程有關，在一定程度上能較大地影響木霉菌素的產(chǎn)量，但Tri3基因可能不是控制木霉菌醇生成木霉菌素過程的唯一基因?；蛘逿ri3編碼的酶調控木霉菌醇生成木霉菌素過程的發(fā)生，只是在發(fā)酵中，這一過程被阻斷，觸發(fā)了旁路反應，導致微量的木霉菌素產(chǎn)生。
　　木霉菌素生物合成相關的Tri基因的研究至關重要，它可使我們明確木霉菌素生物合成