多功能植物小分子肽的研究.pdf

1、本研究以植物蛋白(大豆蛋白和花生蛋白)為原料,采用微射流均質(zhì)技術(shù)結(jié)合復(fù)合酶酶解技術(shù)制備功能性小分子肽,研究了微射流和復(fù)合蛋白酶酶解的最佳工藝條件,并對(duì)小分子肽的結(jié)構(gòu)和功能性質(zhì)進(jìn)行表征和分析,初探了多功能性小分子肽的構(gòu)效關(guān)系。
　　 1、在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用Plackett-Burman設(shè)計(jì),以酸溶蛋白肽的得率為響應(yīng)值,對(duì)影響植物蛋白水解的因子進(jìn)行篩選。本實(shí)驗(yàn)選取了10個(gè)相關(guān)因子進(jìn)行篩選,試驗(yàn)結(jié)果表明底物蛋白的濃度、第一次酶

2、解時(shí)的pH和溫度這三個(gè)為主要影響因子。
　　 2、在Plackett-Burman設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)曲面法(Response SurfaceMethodology,RSM)分析,以酸溶蛋白肽的得率為響應(yīng)值,對(duì)底物蛋白的濃度、第一次酶解時(shí)的pH和溫度3個(gè)關(guān)鍵因素的最佳水平進(jìn)行了優(yōu)化。經(jīng)求解二次多項(xiàng)回歸方程得知,底物蛋白的濃度為8.90％、第一次酶解時(shí)溶液的pH為8.04、溫度為57.80℃時(shí),其酸溶蛋白肽的得率最高為88.11

3、％,相關(guān)系數(shù)為0.9516,所建模型極其顯著(p<0.0008)。
　　 3、采用Sephadex G-25凝膠色譜對(duì)酶解后的溶液進(jìn)行分離純化,得到小分子肽。采用HPLC法對(duì)其相對(duì)分子量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果顯示,小分子肽主要集中在相對(duì)分子量為400Da左右的范圍,該組分的小分子肽具有清除DPPH功能和降膽固醇功能,其DPPH的清除率為44.78％,膽固醇膠束的抑制率為73.2％。
　　 4、采用HPLC-MS法對(duì)M3、M4的結(jié)