現(xiàn)代分析技術(shù)在痕量物質(zhì)分析中的應(yīng)用.pdf

1、“痕量組分”一般是指其樣本含量小于萬分之一的物質(zhì),如藥物中的某些活性較強的成分、環(huán)境中藥物或毒素污染物或者藥物金屬離子污染等,這些物質(zhì)的濃度極低,但都有很強的生理活性,或者在體內(nèi)后有很強的蓄積能力,進而產(chǎn)生對肌體的產(chǎn)生毒害作用,其一直是藥物分析及分析化學(xué)家的研究的焦點。這些物質(zhì)含量較低,采用常規(guī)的分析方法(如高效液相色譜法、紫外光譜法)檢測困難。提高分析方法的靈敏度或開發(fā)高靈敏度的新的分析方法是解決這一問題的主要途徑,然而,對于極其痕量

2、的物質(zhì),尤其是某些pg級以下的物質(zhì),即使使用了高靈敏度的現(xiàn)代分析方法(如MS等),其檢測分析仍然困難,因此,采用適當(dāng)?shù)臉悠非疤幚矸椒?提純富集這些痕量樣品,使其達到可分析的靈敏度水平,是現(xiàn)代分析技術(shù)解決這一問題的另一途徑,也是現(xiàn)代分析技術(shù)的研究熱點;這些新的樣品前處理技術(shù)同時也為解決某些難監(jiān)測物質(zhì)(如樣品MS檢測離子化效率低)的分析檢測提供了新的分析手段。
　　 本課題研究了磷鉬雜多酸-羅丹明B絡(luò)合物共振瑞利散射(RRS)體系,

3、建立了更加靈敏的唑來膦酸分析方法,解決了唑來膦酸輸注液中唑來膦酸檢測困難的問題,考察了體系中硫酸濃度、過硫酸鉀溶液濃度、鉬酸銨溶液濃度、羅丹明B(RDB)溶液濃度、煮沸時間、反應(yīng)溫度及反應(yīng)時間對RRS的影響,優(yōu)化了分析條件,提高了檢測靈敏度,其唑來膦酸的檢測限達了1.55 ng/ml,成功應(yīng)用于唑來膦酸輸注液中唑來膦酸的測定。課題研究了石墨爐原子吸收光譜法分析藥物注射劑中鋁離子污染的檢測中的背景和分析條件,通過塞曼背景校正和基底改進技術(shù)

4、成功解決了樣品背景的干擾問題,通過優(yōu)化干燥、灰化、原子化溫度和時間,提高了方法靈敏度,檢出限達0.14 ng/ml,所建分析方法可不經(jīng)樣品消化處理直接進行分析,滿足了唑來膦酸注射液鋁離子污染的檢測要求。課題采用新型的中空纖維液相微萃取技術(shù),建立了環(huán)境水中痕量雌二醇的富集和純化方法,解決了傳統(tǒng)的液液萃取和固相萃取方式富集率低、有機溶劑使用量大、分析成本高以及交叉污染等難題,研究了萃取效率的影響因素,在優(yōu)化的萃取條件下,環(huán)境水中痕量雌二醇的

5、富集倍數(shù)可達300倍,采用HPLC-UV檢測,其分析靈敏度可達0.1 ng/ml,該方法成功應(yīng)用于環(huán)境水樣中雌二醇的檢測。
　　 一、共振瑞利散射法測定唑來膦酸：
　　 目的:利用共振瑞利散射技術(shù)(RRS),建立靈敏、快速、簡便的唑來膦酸輸注液中唑來膦酸的測定方法。
　　 方法:精密量取供試品1 ml,加1％過硫酸鉀煮沸破壞10min,在0.125mol/L,酸性條件下,依次與0.25 mg/ml鉬酸銨和7×10

6、-6mol/L羅丹明B(RDB)反應(yīng),靜置45 min。在λex=λem=370 nm,狹縫寬度5 nm的條件下,測定RRS強度,用同樣的方法測定空白值強度,以共振散射信號的增加值(△I)計算樣品濃度。
　　 結(jié)果:在優(yōu)化的條件下,共振散射信號的增加值(△I)與唑來膦酸的濃度成正比。唑來膦酸在6.25～100 ng/ml的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,最低檢出限1.55 ng/ml,RSD小于2.1％,回收率為100～101％。磷酸鹽

7、、亞磷酸鹽和其他常見共存物質(zhì)(金屬離子、非金屬離子和無機酸根)等均不干擾測定。
　　 結(jié)論:所建立的共振瑞利散射光譜法分析測定唑來膦酸,方法簡便快速,其靈敏度高達1.55 ng/ml,較傳統(tǒng)鉬藍法提高了近500倍。該方法為唑來膦酸輸注液提供新的分析手段,可用于唑來膦酸輸注液的質(zhì)量控制。
　　 二 GF-AAS研究唑來膦酸注射劑中鋁離子的污染
　　 目的:采用石墨爐原子吸收光譜法(GF-AAS),建立唑來膦酸注射劑

8、中痕量鋁離子的分析方法,用于考察唑來膦酸注射液中鋁離子污染的來源和水平。
　　 方法:取樣品溶液100μl,加入50μl5 mg/ml基底改性劑硝酸鎂,1％硝酸定稀釋至2.5 ml,直接進樣,注入石墨爐中。AAS分析采用熱解涂層石墨管,鋁空心陰極燈檢測波長309.3 nm,燈電流10 mA,狹縫寬度0.4nm,干燥溫度80℃和220℃,灰化溫度700℃和1200℃,原子化溫度2600℃,采用塞曼偏振背景校正的原子吸收光譜法,標(biāo)準(zhǔn)

9、曲線法測定唑來膦酸注射劑中鋁的含量。
　　 結(jié)果:所建立的方法能有效降低唑來膦酸注射液基底效應(yīng)。鋁離子在4.00～20.0 ng/ml的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)r為0.9995。檢出限為0.14 ng/ml,加樣回收率為99％～104％,RSD為2.7％～3.5％。唑來膦酸注射液中鋁離子30天檢測結(jié)果表明,隨著放置時間的延長,鋁離子濃度顯著提高。
　　 結(jié)論:本文建立了塞曼-石墨爐原子吸收法分析唑來膦酸注射液中痕

10、量鋁離子,方法靈敏度高,其檢出限達0.14 ng/ml,樣品未經(jīng)復(fù)雜的消化處理,直接進樣,且加入基底改進劑能有效降低樣品基底效應(yīng)。唑來膦酸注射液穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明,唑來膦酸注射液中鋁離子主要來源于安瓿瓶。
　　 三、中空纖維液相微萃取-高效液相色譜測定環(huán)境水樣中雌二醇
　　 目的:以新型的中空纖維液相微萃取技術(shù)(HF-LPME)為富集和純化手段,建立HPLC-UV法分析環(huán)境水中痕量雌二醇(E2)的方法。
　　 方

11、法:采用聚偏氟乙烯中空纖維,以正辛醇為萃取溶劑,將正辛醇裝入11 cm的中空纖維膜內(nèi),將中空纖維兩端密封后首尾連接,放入140 ml水樣中,于室溫、攪拌速度為500 rpm條件下萃取60 min,萃取后,中空纖維用100μl甲醇沖洗中空纖維內(nèi)壁,合并萃取物在90℃經(jīng)氮氣流吹干后用甲醇溶解,進樣20μl,進行HPLC分析,采用KROMASILC18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流動相為甲醇-水(75∶25),檢測波長280

12、nm,流速1 ml/min,柱溫室溫。
　　 結(jié)果:在優(yōu)化的實驗條件下,樣品中雌二醇的富集因子可達300,雌二醇在1～1000 ng/ml的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)r為0.9995,最低檢出限為0.1 ng/ml?；厥章蕿?7.5％到120.5％之間,RSD為4.7％到7.3％之間。
　　 結(jié)論:本文建立的中空纖維液相微萃取方法較文獻報道的液液萃取方法富集率高,達300倍,提高了分析靈敏度;與固相萃取、固相微萃取