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1、天津大學碩士學位論文運動發(fā)酵單胞菌和大腸桿菌間穿梭質(zhì)粒載體的構(gòu)建姓名：高衛(wèi)華申請學位級別：碩士專業(yè)：化學工藝指導教師：張敏華20040701ABSTRACTZymomonasmobilisisafacultativeanaerobicgramnegativebacterium.BecausetherateofsugarupdateandethanolproductionisbetterthanthatofSaccharomycescer
2、evisae為momonasmobilisisconsideredtobeastrainofpotentialdevelopmentinethanolmanufacture.HoweverthefermentationmaterialusedbyZymomonasmobilisislimitedtoglucosefructoseandsucrose.Toexpandthefermentationrawmaterialrangeeffor
3、thasbeenmadetointroduceheterologousgenesrelatedtoxylosemetabolismintoZymomonasmobilisbygeneticmanipulation.Inthispaperanewshutlevectorbe吸weenZmobilisE.cohisconstructedbyinsertingthe2.7kilobasepair(kb)crypticplasmidpZM2of
4、ZymomonasmobilisATCC10988intotheEscherichiacolivectorpBR328inthesiteofSphldigests.Thenewvector7.656kbplasmidpZBlhastwoselectivemarkersAprandCm`.ThereareseveraluniquerestrictionsitesoneachselectivemarkerAhdIPstlPvuIsiteso
5、nthemarkerofAp`andPspEcoRlNcolonthemarkerofCm`.TherecombinantplasmidpZBIhasbeenclonetoE.coliDH5aandZmobilisCP4successfullyanditsinbothhoststrainshasbeenexamined.InthispaperthegrowthofZmobilisATCC10988andCP4indifferentmed
6、iumiscompared.TheresultsshowthattheTmediumgivesthebeterculture.Twodifferentmethods“SDSalkali“methodand“Nester“methodforpreparingplasmidsofZmobilishavebeencomparedinthispaper.TheplasmidpZM2hasbeencharacterizedbyrestrictio
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