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文檔簡介
1、丁酸是一種重要的有機酸,在化工、食品、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥等領(lǐng)域有著廣泛的用途。丁酸可通過化學合成法或微生物發(fā)酵法生產(chǎn)。發(fā)酵法存在產(chǎn)物濃度低、后處理量大等問題,實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)的成本較高。然而,發(fā)酵法生產(chǎn)丁酸條件溫和,能耗低,污染小,原料來源廣泛,生物源制品也更容易滿足食品和醫(yī)藥級產(chǎn)品的要求。因此,近年來發(fā)酵法受到廣泛的關(guān)注,其中,建立從發(fā)酵液高效提取丁酸的工藝已成為實現(xiàn)其工業(yè)化生產(chǎn)的關(guān)鍵。本文采用萃取和生物催化酯化等技術(shù)對丁酸分離的條件和策略進行
2、了研究。
在萃取法分離丁酸的研究中,經(jīng)過篩選,選擇三辛胺(TOA)為萃取劑,正辛醇為稀釋劑??疾炝薚OA濃度、丁酸溶液pH、相比、溫度等參數(shù)對水溶液中丁酸萃取分配系數(shù)的影響。獲得的最佳萃取條件為:TOA濃度40%(v/v)、丁酸pH2-3、相比0.8、溫度25℃。發(fā)酵液中丁酸萃取和反萃研究結(jié)果表明,發(fā)酵液pH值為2-3,萃取相比為0.3時,能獲得較高的分配系數(shù)(13.91),且可大量減少萃取劑的使用;經(jīng)過兩次萃取,發(fā)酵液中
3、丁酸萃取率可達96.4%;以0.8 M NaOH為反萃劑,相比為1時,丁酸收率達到86.4%;研究表明,該萃取劑具有很好的再生性能。
為探索固定化脂肪酶在酯化法分離丁酸中的應(yīng)用,建立了脂肪酶固定化的新方法。以纖維織物(棉布)為載體,對Candida rugosa脂肪酶進行固定化。建立了聚乙烯亞胺(PEI)活化棉布、酶與PEI-棉布吸附、戊二醛交聯(lián)的三步脂肪酶固定化方法??疾炝薖EI加入量、PEI溶液pH、載體及酶的加入量、
4、戊二醛及穩(wěn)定劑PEG2000的濃度對固定化的影響,獲得最佳條件為:對0.1g脂肪酶進行固定化,PEI加入量為10-20mg,PEI溶液pH為8-10,載體/酶加入質(zhì)量比為12-15,戊二醛濃度為0.1~0.5%,PEG2000濃度為15mg/mL。
對固定化Candida rugosa脂肪酶催化丁酸乙酯的合成進行了研究??疾炝说孜餄舛葹?.5M和0.8M時,酶催化酯化反應(yīng)過程??疾炝朔磻?yīng)溶劑、反應(yīng)體系水活度、溫度、酶用量、
5、底物濃度和醇酸摩爾比等參數(shù)對反應(yīng)的影響,獲得的最佳反應(yīng)條件為:環(huán)己烷為反應(yīng)溶劑,高反應(yīng)體系水活度(0.8-1.0),反應(yīng)溫度為25℃,酶加入量為0.6g,丁酸和乙醇濃度分別為0.6M和0.25M。動力學研究表明,該反應(yīng)符合雙底物抑制Ping Pong Bi-Bi模型,且乙醇是比丁酸更強的抑制劑。該固定化酶具有較好的操作穩(wěn)定性和儲存穩(wěn)定性。建立了固定化酶循環(huán)批次反應(yīng)器并將其用于丁酸乙酯的合成反應(yīng),終產(chǎn)物濃度、產(chǎn)率和酯化率分別為0.85M、
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