2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、2-羥基異丁酸(2-Hydroxyisobutyric acid,簡(jiǎn)寫2-HIBA)是一種有多用途的重要的化工產(chǎn)品,它可參與多種有機(jī)合成反應(yīng)生成一系列化合物,以它為平臺(tái)可以衍生出許多重要的其它化工產(chǎn)品,在許多領(lǐng)域有潛在的應(yīng)用前景。由于其結(jié)構(gòu)特殊,目前為發(fā)現(xiàn)其天然的微生物法合成途徑?;瘜W(xué)方法生產(chǎn)具有成本高、生成條件苛刻、污染大等缺點(diǎn),隨著合成生物學(xué)、分子生物學(xué)和代謝工程學(xué)等迅速發(fā)展,利用生物轉(zhuǎn)化的方法生產(chǎn)2-羥基異丁酸成為可能。
 

2、 本論文就微生物法生產(chǎn)2-羥基異丁酸進(jìn)行了初步的探索研究。以重組大腸桿菌為宿主,構(gòu)建了bktB、hbd、icmA、icmB和tesB等5個(gè)基因的表達(dá)載體pEnBHTI,以葡萄糖降解產(chǎn)生的乙酰CoA為前體,經(jīng)過4步代謝途徑,以期能夠合成2-羥基異丁酸。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),含有pEnBHTI的大腸桿菌能夠以葡萄糖為碳源獲得3-羥基丁酸,未檢測(cè)到明顯的2-羥基異丁酸積累,提示bktB、hbd和tesB成功表達(dá),但是icmAB表達(dá)量可能較低,或是te

3、sB對(duì)2-羥基異丁酰輔酶A的催化活性較低,導(dǎo)致以重組大腸桿菌為宿主未能獲得產(chǎn)物。
  在此基礎(chǔ)上,以嗜水氣單胞菌為宿主,利用其脂肪酸氧化過程中產(chǎn)生的羥基丁酰輔酶A為前體,通過構(gòu)建icmA和icmB的表達(dá)載體pMCSV12,在嗜水氣單胞菌單胞菌中構(gòu)建2-羥基異丁酸的生物合成途徑。對(duì)重組菌株進(jìn)行搖瓶培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)其能夠合成微量的2-羥基異丁酸;進(jìn)而采用不同的脂肪酸碳源、兩步法發(fā)酵等對(duì)培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,最終獲得了46 mg/L的產(chǎn)量。本論文

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