Ames試驗(yàn)評(píng)價(jià)聚β-羥基丁酸酯(PHB)的生物相容性.pdf

1、目的: 提高鎂合金耐蝕性的有效途徑之一是在鎂基體表面提供一層耐蝕的表面層作為腐蝕屏障，對(duì)基體形成有效保護(hù)?；诂F(xiàn)代表面技術(shù)的發(fā)展以及環(huán)保的要求，微弧氧化、金屬鋁涂層、含氟協(xié)合涂層、氣相沉積、離子注入等新技術(shù)在改善鎂合金耐蝕性方面越來越受到青睞，而聚β—羥基丁酸酯涂層更是一項(xiàng)有良好發(fā)展前景的新技術(shù)。 聚β—羥基丁酸酯(簡(jiǎn)稱PHB)是一種由微生物在不平衡生長(zhǎng)條件下存儲(chǔ)于細(xì)胞內(nèi)的一種天然高分子聚合物，廣泛存在于自然界許多原核生

2、物中，在藥物釋放和組織工程方面有廣泛的應(yīng)用。本研究根據(jù)ISO相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，從材料是否致基因突變的角度，進(jìn)行Ames試驗(yàn)，用材料浸提液對(duì)聚β—羥基丁酸酯的生物相容性進(jìn)行初步研究測(cè)試，為預(yù)測(cè)該材料的遺傳危害和潛在致癌性提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)。 方法: 1、菌株遺傳性狀鑒定 分別進(jìn)行對(duì)組氨酸的要求，脂多糖屏障缺陷，紫外線損傷修復(fù)缺陷，抗氨芐青霉素試驗(yàn)，抗四環(huán)素試驗(yàn)和自發(fā)回變六項(xiàng)試驗(yàn)。遺傳性狀鑒定合格后，37℃振蕩培養(yǎng)，使增菌液濃度達(dá)

3、到1—3×109個(gè)/ml。 2、培養(yǎng)基 共用4種培養(yǎng)基按標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames)要求制作。 3、活化系統(tǒng) S—9及S—9mix均按Ames原法要求制作、使用和保存。 4、劑量設(shè)計(jì) 將樣品聚合物片清洗(乙醇，超聲波)滅菌后，以生理鹽水為浸提介質(zhì)，參照GB/T16886.12—2000所規(guī)定的浸提液制備方法，以材料表面積(雙面)/浸提介質(zhì)為3 c㎡/ml的比例，制備標(biāo)準(zhǔn)浸提液(原液)

4、，并設(shè)2倍、4倍、1/2原液4個(gè)不同濃度的浸提液；37℃±1℃，24h±2h浸提供試。 5、Ames試驗(yàn) 計(jì)數(shù)TA97，TA98，TA100，TA102，TA1535標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試菌株在四個(gè)不同濃度浸提液下，37℃48h后的回變菌落數(shù)。 結(jié)果: 聚β—羥基丁酸酯細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames)，各劑量組細(xì)菌回變數(shù)小于陰性對(duì)照組細(xì)菌回變數(shù)的2倍。聚β—羥基丁酸酯細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)，各菌株、各劑量組無論代謝活化與否，皆為