小分子黃酮包合物的制備及活性研究.pdf

1、本論文探討了用飽和水溶液電動攪拌法制備異甘草素(isoliquiritigenin)和4’，7-二羥基異黃酮(daidzein)β-環(huán)糊精包合物的最佳工藝，利用熒光光譜法從分子水平研究異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮兩個黃酮類小分子化合物與人血清白蛋白的相互作用，采用平板打孔法和二倍稀釋法測定異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮及其β-環(huán)糊精包合物對藤黃微球菌(micrococcus luteus)的體外抑菌活性。論文分為以下五個部分：

2、r>　　 1.綜述了β-環(huán)糊精和HSA的結構及性質，介紹了β-環(huán)糊精包合物的制備方法和研究進展以及小分子與蛋白相互作用的主要方法和研究進展，為本論文的展開鋪墊了理論依據(jù)。
　　 2.篩選制備異甘草素-β-CD包合物的最佳方法和最佳制備條件，以收率和包合率為指標，通過超聲法、微波法和飽和水溶液電動攪拌法比較，得到制備異甘草素-β-CD包合物的最佳包合方法是飽和水溶液電動攪拌法。利用計算機模擬得到異甘草素和β-CD可能的包合方式為

3、：異甘草素的A環(huán)進入β-CD的大口端，B環(huán)進入β-CD的小口端。然后采用正交設計實驗優(yōu)化工藝條件，最佳包合條件為：異甘草素和β-CD的配比(摩爾比)1:2，包合時間5h、溫度60℃。包合率>98%，并通過IR和X-RD對包合物進行了驗證。
　　 3.利用飽和水溶液電動攪拌法制備了4’，7-二羥基異黃酮-β-CD包合物，并通過IR和X-RD對其進行鑒定。熒光光度法確定了4’，7-二羥基異黃酮和β-CD的摩爾配比為1:2。
　

4、　 4.利用熒光光譜法研究了異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮與HSA的相互作用。研究結果表明，異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮對HSA的內源熒光都有猝滅作用，猝滅類型都屬于靜態(tài)猝滅。由結合位點數(shù)表明異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮在HSA上有1個結合位點。根據(jù)不同溫度下的熱力學參數(shù)，推導出異甘草素與HSA相互作用力主要是疏水相互作用，而4’，7-二羥基異黃酮與HSA相互作用力主要是靜電引力。采用同步熒光光譜和三維熒光光譜研究了異甘草素

5、和4’，7-二羥基異黃酮對HSA構象的影響，表明異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮的加入使HSA疏水腔微環(huán)境極性發(fā)生了改變，進而導致了HSA構象的變化。
　　 5.采用高效液相色譜法，以異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮相對含量為考察指標，考察了其環(huán)糊精包合物在溫度、濕度、光度影響下的穩(wěn)定性。采用平板打孔法二倍稀釋法測定了異甘草素和4’，7-二羥基異黃酮及其包合物對藤黃微球菌的體外抑菌活性。研究結果表明：異甘草素和4’，7-二羥基異