海參中呋喃唑酮藥殘的膠體金免疫層析現(xiàn)場快速檢測技術(shù).pdf

1、近年來，食品安全問題頻繁發(fā)生，獸藥殘留尤其是海產(chǎn)品獸藥殘留問題更是引起了國內(nèi)外的廣泛關(guān)注。硝基呋喃類藥物是一類人工合成的廣譜類抗菌藥物，因其具有殺菌效果好、價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于動物養(yǎng)殖業(yè)中，但是硝基呋喃類抗生素的代謝物會在動物體內(nèi)蓄積，進(jìn)而對人體造成傷害，所以我國及世界大多數(shù)國家都已經(jīng)將硝基呋喃類藥物列為禁用藥物。
　　目前，膠體金免疫檢測技術(shù)在獸藥殘留的檢測中已經(jīng)形成了自己獨(dú)特的優(yōu)勢，這就使得與大型儀器分析方法相比，不同

2、海產(chǎn)品的藥殘分析過程變得簡單快速，這一檢測方法已經(jīng)被大范圍推廣使用。經(jīng)過多年研究，目前市場上已經(jīng)推出了對應(yīng)藥殘的膠體金免疫檢測試劑卡，然而關(guān)于這些試劑卡的效能以及如何優(yōu)化膠體金免疫檢測的前處理，做到在實(shí)際檢測過程中避免有機(jī)試劑萃取、多次離心等復(fù)雜操作尚無明確的研究和報(bào)道。
　　本研究以仿刺參為實(shí)驗(yàn)對象，采用高溫加熱和鹽酸酸處理相結(jié)合的方法消除海參中蛋白和海參多糖的基質(zhì)效應(yīng)，從而省略藥物衍生后用有機(jī)試劑萃取來消除基質(zhì)效應(yīng)這一繁瑣的步

3、驟，實(shí)現(xiàn)了衍生后直接檢測，建立新的前處理方法，使整個(gè)檢測過程減少對大型儀器的利用率，檢測時(shí)間縮短到60min以內(nèi)，并且使膠體金免疫檢測的靈敏度達(dá)到國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求，從而進(jìn)一步改善了現(xiàn)有商品化試劑卡普遍存在的前處理不合理的缺陷。主要的研究內(nèi)容如下:
　　1.探索實(shí)驗(yàn)前期的各種因素，包括檢測卡的檢測性能及在藥物衍生后不經(jīng)提取直接檢測的情況下，海參基質(zhì)對檢測結(jié)果產(chǎn)生的影響。實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論，當(dāng)呋喃唑酮代謝物(AOZ)標(biāo)準(zhǔn)液的濃度≥0.25

4、μg/L時(shí)，即可出現(xiàn)陽性的檢測結(jié)果，且穩(wěn)定性和特異性都良好;海參多糖及其與蛋白質(zhì)的共同作用為干擾檢測的最大基質(zhì)。
　　2.摸索消除海參基質(zhì)干擾的最佳條件和方法，確定最佳的前處理方法是將海參樣品在衍生前用80℃水浴加熱5 min并結(jié)合終濃度為0.1 mol/L鹽酸處理，可有效消除基質(zhì)干擾;衍生化條件優(yōu)化結(jié)果為60℃水浴衍生45min時(shí)，可以達(dá)到理想的檢測效果，并使檢測時(shí)間進(jìn)一步縮短。最終建立的檢測方法對海參中AOZ的檢出限為≥0.5