呼出氣檢測(cè)在鑒別鮑曼不動(dòng)桿菌呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎與定植中的研究.pdf

1、重癥監(jiān)護(hù)室(ICU)中包括鮑曼不動(dòng)桿菌在內(nèi)的多重耐藥菌感染已給呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎(VAP)患者的診治帶來(lái)巨大壓力。為避免不必要的抗生素使用，臨床上及時(shí)鑒別菌株感染與定植的不同狀態(tài)顯得格外重要。目前下呼吸道標(biāo)本內(nèi)細(xì)菌的定量培養(yǎng)有賴于一些有創(chuàng)性操作。為尋找病原菌來(lái)源的生物標(biāo)志物，已有報(bào)道關(guān)于在體內(nèi)外環(huán)境中檢測(cè)揮發(fā)性有機(jī)物(VOCs)的研究。鑒于此，我們?cè)O(shè)計(jì)了此項(xiàng)探索性的臨床初步試驗(yàn)，預(yù)測(cè)鮑曼不動(dòng)桿菌來(lái)源的代謝物及其濃度值可能與有創(chuàng)通氣患者下呼

2、吸道內(nèi)存在該菌及其不同的生態(tài)微環(huán)境（感染與定植狀態(tài)）相關(guān)。
　　方法:
　　鮑曼不動(dòng)桿菌VAP的定義參照2013年中華醫(yī)學(xué)會(huì)重癥醫(yī)學(xué)分會(huì)與2005年美國(guó)胸科學(xué)會(huì)與感染病學(xué)會(huì)(ATS/IDSA)制定的關(guān)于HAP/VAP的指南執(zhí)行。體內(nèi)研究中納入鮑曼不動(dòng)桿菌VAP患者20例（感染組），接受有創(chuàng)通氣的鮑曼不動(dòng)桿菌下呼吸道定植患者20例（定植組），以及因罹患神經(jīng)系統(tǒng)疾病而需要接受有創(chuàng)通氣但無(wú)肺部感染與下呼吸道細(xì)菌定植的患者20例（對(duì)

3、照組）。排除存在結(jié)構(gòu)性肺病如慢性阻塞性肺疾病(COPD)與支氣管擴(kuò)張，及呼吸道腫瘤、哮喘的患者。臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌菌株用于體外培養(yǎng)研究。共40例接種鮑曼不動(dòng)桿菌的培養(yǎng)組及40例未接種鮑曼不動(dòng)桿菌的陰性對(duì)照組納入體外研究。研究中使用了預(yù)雷集吸附技術(shù)（固相微萃取針和Tenax(@) TA吸附管），以及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析技術(shù)。運(yùn)用GC-MSsolution(LabSolutions，Shimadzu(@))和自動(dòng)質(zhì)譜解卷積鑒定系統(tǒng)(A

4、MDIS，NIST)軟件對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，包括去噪、基線校正（設(shè)置漂移與斜率參數(shù)）、重疊峰解析及歸一化處理。
　　結(jié)果:
　　在呼出氣體采集時(shí)，感染組患者較定植組患者及對(duì)照組患者在肝腎功能、全身炎癥反應(yīng)強(qiáng)度及呼吸機(jī)支持水平上均存在顯著性差異。呼出氣體譜能顯著區(qū)別鮑曼不動(dòng)桿菌體外培養(yǎng)組與空白對(duì)照組，以及體內(nèi)研究中的VAP感染組、細(xì)菌定植組和對(duì)照組患者。在體外細(xì)菌培養(yǎng)頂空氣體中，共檢測(cè)到9種靶物質(zhì)，即2，5-二甲基吡嗪、1-

5、十一烯、異戊酸異戊酯、癸醛、1，3-萘二酚、長(zhǎng)葉烯、十四烷、亞胺聯(lián)芐和3-甲基茚，可能來(lái)源于該菌體外生長(zhǎng)代謝。在臨床研究中，共有8種靶物質(zhì)，即1-十一烯、壬醛、癸醛、2，6，10-三甲基-十二烷、5-甲基-5-丙基-壬烷、長(zhǎng)葉烯、十四烷和2-丁基辛醇，推測(cè)來(lái)源于鮑曼不動(dòng)桿菌VAP患者。由上述8種靶物質(zhì)組成的呼出氣體譜能有效鑒別細(xì)菌組（有感染組和定植組合并）與對(duì)照組患者(AUC=0.89)，以及感染組與定植組患者(AUC=0.88)。體內(nèi)

6、、外實(shí)驗(yàn)中，共有4種相同靶物質(zhì)（1-十一烯、癸醛、長(zhǎng)葉烯和十四烷）。體內(nèi)外研究中，不同基因型菌株間代謝譜未見(jiàn)明顯差異。
　　結(jié)論:
　　鑒于鮑曼不動(dòng)桿菌體內(nèi)外研究中代謝譜的巨大差異，我們不能簡(jiǎn)單地將體外研究數(shù)據(jù)應(yīng)用于體內(nèi)環(huán)境。此項(xiàng)前瞻性研究證實(shí)了直接檢測(cè)呼出氣中鮑曼不動(dòng)桿菌來(lái)源的VOCs譜或許可以早期預(yù)警ICU內(nèi)有創(chuàng)通氣患者下呼吸道中存在該細(xì)菌，甚至鑒別該細(xì)菌不同的生存狀態(tài)（定植或感染）。后期如要實(shí)現(xiàn)臨床應(yīng)用，需要進(jìn)一步研究