普萘洛爾對(duì)骨代謝影響的初步研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)旨在研究普萘洛爾對(duì)兔成骨細(xì)胞的增殖和分化及破骨細(xì)胞形成的影響，探討普萘洛爾對(duì)骨代謝的影響機(jī)制,為更深入認(rèn)識(shí)普萘洛爾在骨代謝中發(fā)揮的作用提供線索和依據(jù)。
　　方法：（1）提取兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs），誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞（OB），并通過(guò)ALP染色和茜素紅染色對(duì)其進(jìn)行鑒定。（2）以兔OB為體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，以不同濃度普萘洛爾?0-2μmol/ml，10-3μmol/ml，10-4μmol/ml）分別刺激體外培養(yǎng)的兔OB后，

2、用MTT法檢驗(yàn)普萘洛爾對(duì)兔OB增殖能力的影響，用RT-PCR法檢驗(yàn)成骨細(xì)胞中OPG和RANKL mRNA的表達(dá)，用ELISA檢測(cè)上清液中OPG和RANKL蛋白的含量。（2）分離培養(yǎng)兔破骨細(xì)胞(OC)，以不同濃度普萘洛爾(10-2μmol/ml，10-3μmol/ml，10-4μmol/ml)分別刺激體外培養(yǎng)的兔OC72h后，用TRAP及甲苯胺藍(lán)染色檢測(cè)其對(duì)OC的影響。
　　結(jié)果：1）通過(guò)ALP染色和茜素紅染色證實(shí)所誘導(dǎo)的為成骨細(xì)胞

3、；2）與不加普萘洛爾的對(duì)照組相比，不同濃度的普萘洛爾給藥48h,72h,OD值均高于對(duì)照組(P＜0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；96h后實(shí)驗(yàn)組OD值均低于對(duì)照組(P>0.05)，沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且48h和72h時(shí)在普萘洛爾10-3μmol/ml時(shí),OD值最大(P＜0.05)；3）ELISA和RT-PCR結(jié)果均顯示普萘洛爾作用于成骨細(xì)胞后，OPG含量均高于對(duì)照組，RANKL則相反，OPG/RANKL的比值實(shí)驗(yàn)組也均高于對(duì)照組。4）與對(duì)照組相比