凝固酶陰性葡萄球菌致病性分子標志物的建立與應用.pdf

1、目的：建立適用于常規(guī)檢測的致病性凝固酶陰性葡萄球菌(coagulase-negativestaphylococci，CoNS)特異性分子標志物，評價其臨床意義。
　　 方法：本文以生物膜形成作為致病因素，采用常規(guī)生化鑒定、剛果紅試驗、體外黏附性實驗以及PCR等方法對臨床標本中分離到的114株CoNS進行表型鑒定和特異性分子標志物的檢測。
　　 結(jié)果：
　　 1、表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌為臨床最常見的菌株，分別占

2、總數(shù)的41.2％及37.7％。
　　 2、剛果紅試驗陽性結(jié)果為24例，陽性率約為21.1％。其中18例為表皮葡萄球菌，占總陽性率的75％。
　　 3、icaD片段擴增總陽性率是29.0％(33/114)，表明大部分CoNS不表達胞外多糖，無致病性。
　　 4、選取12株菌(包括剛果紅試驗陽性PCR陰性3株，剛果紅陰性PCR陽性3株，兩法均陽性6株)進行體外黏附性實驗，其陽性率為83.3％(10/12)，但因?qū)嶒灷?/p>

3、數(shù)較少，有待進一步驗證。
　　 5、37例凝固酶陰性葡萄球菌樣品進行了16S rDNA基因及sodA基因片段的PCR擴增，電泳檢測結(jié)果顯示全部樣品均能準確地擴增出相應的片段，其片段大小分別為16SrDNA926bp及sodA482bp，且均為單一條帶，序列測定表明所有樣品16S rDNA及sodA PCR產(chǎn)物序列均相同。
　　 結(jié)論：
　　 1、本研究首次報道了除表皮葡萄球菌以外的其他種的凝固酶陰性葡萄球菌產(chǎn)生多

4、糖胞間粘附因子的情況；
　　 2、表皮葡萄球菌在臨床CoNS中檢出最多，是攜帶icaD操縱子的主要菌種，其致病性應引起足夠重視；
　　 3、ica操縱子可出現(xiàn)在多種CoNS中，臨床實驗室建立并常規(guī)進行凝固酶陰性葡萄球菌致病性的檢測是有意義、有必要的；
　　 4、16S rDNA以及sod A基因可作為鑒定CoNS的基因標記，但不能用來作為致病性與非致病性的葡萄球菌的鑒別依據(jù)。
　　 5、目前區(qū)分致病性與非