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1、凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)已經(jīng)成為引起奶牛乳腺炎的常見(jiàn)病原菌,通常引起隱性乳腺炎或者表現(xiàn)溫和的臨床型乳腺炎。CNS使感染乳區(qū)的牛奶體細(xì)胞(SCC)升高,盡管與金黃色葡萄球菌和鏈球菌等主要細(xì)菌比較相對(duì)溫和,但是CNS乳腺炎高患病率會(huì)影響奶牛場(chǎng)桶奶的SCC。CNS包括50多種不同的亞種葡萄球菌,在乳腺炎診斷學(xué)上,通過(guò)凝固酶試驗(yàn)和金黃色葡萄球菌區(qū)別開(kāi)來(lái)。很多不同種類(lèi)的CNS已經(jīng)從牛奶、奶牛毛發(fā)、乳房皮膚和乳頭管道分離得到,但沒(méi)有進(jìn)一步鑒定到
2、亞種水平,對(duì)該類(lèi)細(xì)菌引起的患病乳區(qū)通常采用抗生素治療。本研究對(duì)由CNS感染引起的奶牛乳腺炎進(jìn)行研究,確定引起隱性乳腺炎和臨床型乳腺炎的主要CNS亞種,CNS感染對(duì)牛奶體細(xì)胞(SCC)的影響,以及CNS對(duì)常用抗菌藥物耐藥性,為進(jìn)一步有效預(yù)防和治療CNS型乳腺炎提供參考。1.奶牛臨床型乳腺炎主要病原菌2009年11月~2010年3月對(duì)浙江省杭州、金華、臺(tái)州三地的奶牛臨床型乳腺炎進(jìn)行普查,結(jié)果發(fā)現(xiàn),臨床型乳腺炎檢出率約為7.00%,其中杭州地
3、區(qū)約為6.75%,金華地區(qū)約為6.90%,臺(tái)州地區(qū)約為7.69%。采集臨床型乳腺炎的奶樣,進(jìn)行細(xì)菌學(xué)分離鑒定,發(fā)現(xiàn)浙江省杭州、金華、臺(tái)州三地的奶牛臨床型乳腺炎的主要病原菌為葡萄球菌和鏈球菌。其中CNS檢出率約為40.8%,杭州地區(qū)為43.3%,金華地區(qū)為36.0%,臺(tái)州地區(qū)為42.9%。對(duì)分離到的31株臨床型CNS用TH-16S葡萄球菌生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行亞種鑒定,共鑒定出9個(gè)亞種,其中主要為模仿葡萄球菌(19.4%)、木糖葡萄球菌(16.
4、1%)、表皮葡萄球菌(12.9%)、頭葡萄球菌(12.9%)、緩慢葡萄球菌(12.9%)。2.奶牛隱性乳腺炎主要病原菌及其與SCC關(guān)系采集了某規(guī)?;翀?chǎng)314份奶樣,進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查、CNS亞種鑒定以及牛奶體細(xì)胞計(jì)數(shù),結(jié)果發(fā)現(xiàn)120個(gè)低體細(xì)胞奶樣(SCC<25×104/mL)中8.33%的奶樣分離到CNS,其余奶樣細(xì)菌培養(yǎng)陰性。194個(gè)高體細(xì)胞奶樣(SCC≥25×104/mL)的細(xì)菌檢出率高達(dá)72.2%,主要為金黃色葡萄球菌、CNS、大腸
5、桿菌、乳房鏈球菌、停乳鏈球菌等,其中CNS的檢出率最高為28.8%,其次是金黃色葡萄球菌為15.5%。對(duì)52株CNS分離菌用TH-16S葡萄球菌生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行亞種鑒定,共鑒定出12個(gè)亞種,其中主要為松鼠葡萄球菌(44.2%)、表皮葡萄球菌(11.5%)、人葡萄球菌(11.5%)、溶血葡萄球菌(7.69%)。不同細(xì)菌感染乳區(qū)的牛奶體細(xì)胞數(shù)有顯著差異(P<0.05)。體細(xì)胞數(shù)從低到高的乳區(qū)依次為:細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)陰性的乳區(qū),感染CNS的乳區(qū)和感
6、染主要病原的乳區(qū)。感染不同CNS亞種乳區(qū)的牛奶體細(xì)胞數(shù)也有顯著差異(P<0.05)。感染松鼠葡萄球菌和表皮葡萄球菌乳區(qū)的牛奶體細(xì)胞數(shù)顯著高于感染人型葡萄球菌和溶血葡萄球菌乳區(qū)的牛奶體細(xì)胞數(shù)。3.常用抗菌藥物對(duì)奶牛乳腺炎CNS亞種體外抗菌作用用標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法對(duì)31株臨床型乳腺炎CNS亞種進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn)CNS對(duì)臨床常用的青霉素、慶大霉素、紅霉素均有很高的耐藥率,分別為90.3%、80.6%、67.7%,其次為苯唑西林、四環(huán)素、氨芐西
7、林-舒巴坦、環(huán)丙沙星、克林霉素、頭孢西丁,耐藥率分別為64.5%、58.1%、54.8%、38.7%、29.0%、22.6%,而對(duì)利福平、萬(wàn)古霉素耐藥率低,分別為16.1%、12.9%。用標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法對(duì)52株隱性乳腺炎CNS亞種進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn)CNS對(duì)臨床常用的紅霉素、青霉素、慶大霉素均有很高的耐藥率,分別為82.7%、71.2%、53.8%,其次為苯唑西林、四環(huán)素、氨芐西林-舒巴坦、克林霉素、環(huán)丙沙星、利福平,耐藥率分別為44
8、.2%、32.7%、26.9%、23.1%、19.2%、11.5%,而對(duì)萬(wàn)古霉素、頭孢西丁耐藥率低,均為3.85%。綜上所述,CNS在隱性乳腺炎和臨床型乳腺炎奶樣中都有較高的分離比例,已經(jīng)成為奶牛乳腺炎的常見(jiàn)病原菌。CNS可以引起牛奶體細(xì)胞的顯著升高。奶牛隱性乳腺炎中分離到較多的是松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌和人葡萄球菌;臨床型乳腺炎中分離到較多的是模仿葡萄球菌和木糖葡萄球菌。CNS對(duì)臨床常用的青霉素、慶大霉素和紅霉素有較高的耐藥率,而對(duì)
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