三種生物的GABA受體基因亞克隆與表達(dá)的初步研究.pdf

1、A型γ-氨基丁酸（aminobutyric acid，GABA）受體是一類配體門控離子通道型受體，是脊椎動(dòng)物和非脊椎動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)最主要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA的受體，由其同源或異源五聚體構(gòu)成的離子通道上存在許多藥物的作用靶點(diǎn)，因此該受體也是醫(yī)藥和農(nóng)藥工作者研究的重點(diǎn)。但是天然的受體在個(gè)體上的數(shù)量比較少，亞克隆表達(dá)有利于大量獲得有活性的受體，對(duì)于開發(fā)新的，高效的，安全的農(nóng)藥具有重要的指導(dǎo)意義。本文通過分子亞克隆技術(shù)嘗試對(duì)脊椎動(dòng)物和

2、昆蟲的GABA受體及其突變抗狄氏劑的受體(RDL)的克隆及異源表達(dá)做了部分研究。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法研究果蠅GABA受體的整體及部分結(jié)構(gòu)的信息。從NCBI庫上搜到的果蠅的RDL全序列分為全長，和截去部分N端胞外區(qū)進(jìn)行構(gòu)建，分別與表達(dá)載體pET21a融合，結(jié)果是在37℃IPTG0.5mM誘導(dǎo)3h條件下E.coli BL21(DE3)細(xì)胞里誘導(dǎo)表達(dá)，全長含有HisTag的蛋白有表達(dá)，而截去部分未表達(dá)即使換表達(dá)菌株也無