孕酮對于小鼠胚胎干細胞增殖作用影響的研究ES分化過程中mvh剪接體的研究.pdf

1、1.孕酮對小鼠胚胎干細胞增殖作用影響的研究
　　2.ES分化過程中mvh剪切體的研究
　　 第一部分:胚胎干細胞(embryonic stem cells,ES)具有自我更新和多項分化的潛能。研究表明雌激素促進小鼠胚胎干細胞的增值。為了探討孕酮對小鼠胚胎干細胞(mES)的影響,分別采用細胞增殖試驗(MTT法),克隆形成試驗檢測了孕酮對于胚胎干細胞的影響,結(jié)果顯示孕酮有促進細胞增殖的作用和促進單個胚胎干細胞存活的能力。細胞

2、周期檢測進一步證實加入孕酮后,和對照組相比,胚胎干細胞處在分裂期的細胞比例增多,處在S期和G2+M期的細胞比例增多。說明孕酮促進了ES細胞的DNA合成,細胞分裂速度加快,為了檢測加入孕酮后對胚胎干細胞多能性的影響,Western blot結(jié)果顯示加入孕酮后胚胎干細胞的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子Oct-4的表達變化不大,說明細胞仍然處在干細胞的未分化狀態(tài)。細胞增殖和調(diào)控細胞周期的因子有關(guān),Real-time PCR檢測了和細胞周期有關(guān)cyclin,CD

3、K以及一些原癌基因c-myc,c-jun,c-fos.發(fā)現(xiàn)部分表達上調(diào),孕酮促生長的作用可能和這些因子的表達水平升高有關(guān)。結(jié)論:孕酮有促進ES細胞增殖和存活的作用。
　　 第二部分:在EB分化過程中,生殖細胞特異的基因mvh(mouse vasa homologue)會表達。Mvh調(diào)節(jié)靶mRNA的翻譯,這些mRNA編碼一些生殖細胞特異的蛋白。Mvh在細胞RNA代謝中具有重要作用,參與RNA代謝的幾乎所有過程,包括轉(zhuǎn)錄調(diào)控、mRN