凡納濱對(duì)蝦性腺抑制激素基因的克隆與表達(dá).pdf_第1頁
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1、性腺抑制激素(gonad inhibiting hormone,GIH)是甲殼動(dòng)物X-器官-竇腺復(fù)合體分泌的一種神經(jīng)內(nèi)分泌多肽類激素,對(duì)雌、雄個(gè)體的性腺發(fā)育、蛻皮及甲基法尼酯(methyl farnesoate,MF)的分泌均有抑制作用。本文以性腺發(fā)育成熟的凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)為研究對(duì)象,利用RACE技術(shù)克隆獲得GIH基因cDNA片段(含3’UTR),預(yù)測(cè)GIH基因編碼的氨基酸序列,并利用生物信息學(xué)方法

2、進(jìn)行分析;利用半定量RT-PCR方法檢測(cè)凡納濱對(duì)蝦八個(gè)不同發(fā)育時(shí)期(受精卵、無節(jié)幼體、蚤狀幼體、糠蝦幼體、仔蝦25天、仔蝦30天、仔蝦35天和仔蝦40天),以及雌雄成體不同組織(肌肉、腦、眼柄、胃腸、鰓、心臟、卵巢和精巢)中的表達(dá),并檢測(cè)了環(huán)境內(nèi)分泌干擾物壬基酚(nonylphenol,NP,100μg/L和0.01μg/L)對(duì)凡納濱對(duì)蝦雌蝦眼柄中GIH基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明:凡納濱對(duì)蝦GIH cDNA片段長(zhǎng)為683bp,其中3’非編

3、碼區(qū)(3’UTR)為518bp,可讀編碼框162bp,編碼54個(gè)氨基酸,在Poly(A)尾前15bp處存在AATAAA加尾信號(hào)。凡納濱對(duì)蝦GIH與斑節(jié)對(duì)蝦相似性最高,達(dá)到96%,與刀額新對(duì)蝦相似性為72%。通過與Genbank上已知氨基酸序列進(jìn)行蛋白比對(duì),發(fā)現(xiàn)凡納濱對(duì)蝦GIH中具有CHH蛋白家族共有的4個(gè)保守的半胱氨酸殘基。凡納濱對(duì)蝦GIH基因在受精卵、幼體發(fā)育階段及仔蝦時(shí)期的眼柄中均有表達(dá),35天時(shí)達(dá)到最高值(0.936±0.021)

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