不同桑黃生物特征的比較及咖啡酸烷基酯的抑菌作用.pdf

1、桑黃，具有很高藥理活性和藥用價(jià)值的非常珍貴的中國(guó)傳統(tǒng)中藥，是目前為止發(fā)現(xiàn)的生物抗癌作用有效率最高的真菌。組織分離法分離野生桑黃菌株 CA，擴(kuò)大了桑黃的種質(zhì)資源。桑黃提取咖啡酸及咖啡酸甲酯合成的咖啡酸酯類有較好的抑菌活性。
　　本文通過組織分離法從野生桑黃子實(shí)體分離菌種，與收集到的不同來源的桑黃菌種進(jìn)行形態(tài)學(xué)比較；通過不同來源的桑黃間的拮抗作用，探討桑黃間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近。采用PCR技術(shù)對(duì)不同來源的桑黃進(jìn)行分子鑒定，韓國(guó)桑黃、金寨桑黃

2、、盛唐桑黃和唐桑桑黃屬于P. baumii種屬；淳安桑黃和華中桑黃屬于P. linteus種屬。通過ITS序列分析并構(gòu)建進(jìn)化樹，進(jìn)行遺傳分析。金寨桑黃、韓國(guó)桑黃和盛唐桑黃具有比較近的親緣關(guān)系，淳安桑黃和華中桑黃親緣關(guān)系較近，唐桑桑黃親緣關(guān)系距離較遠(yuǎn)。
　　通過對(duì)桑黃菌液體培養(yǎng)條件的優(yōu)化，對(duì)桑黃菌培養(yǎng)基的活性成分的有效利用，獲得更多的桑黃菌絲體。以桑黃菌絲體干重為指標(biāo)，對(duì)桑黃發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化和發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，得到最優(yōu)培養(yǎng)基的條件

3、是：葡萄糖為碳源，大豆蛋白胨為氮源；最優(yōu)培養(yǎng)條件是：pH是6，溫度是30 ℃，轉(zhuǎn)速是140 r/min，接種量是4％。桑黃含有的藥理活性物質(zhì)以多糖為主，對(duì)人體疾病的預(yù)防和保健有著顯著的作用。以桑黃的多糖得率為指標(biāo)，利用超聲波復(fù)合酶法對(duì)桑黃多糖的提取條件進(jìn)行優(yōu)化，得到桑黃多糖最優(yōu)的提取方式是：添加纖維素酶3%，木瓜蛋白酶2%和果膠酶為1.5%，料液比1:50，50 ℃的溫度超聲45 min。多糖提取率最高為10.867%。將不同來源的桑黃

4、多糖通過紅外掃描，建立紅外指紋圖譜分析，進(jìn)行桑黃多糖的鑒別。
　　本文測(cè)定桑黃多糖對(duì)ABTS和DPPH的清除能力，對(duì)不同來源的桑黃多糖的抗氧化能力的強(qiáng)弱進(jìn)行比較，比較不同來源的桑黃多糖對(duì)ABTS和DPPH自由基清除能力的差異。根據(jù)ABTS的IC50值，各桑黃多糖自由基清除能力從高到低依次為：韓國(guó)多糖＞金寨多糖＞唐桑多糖＞華中多糖＞淳安多糖＞盛唐多糖；根據(jù)DPPH的 IC50值，各多糖自由基清除能力從高到低依次為：金寨多糖＞華中多糖

5、＞唐桑多糖＞淳安多糖＞盛唐多糖＞韓國(guó)多糖。除韓國(guó)桑黃多糖外，其他桑黃多糖對(duì)水溶性自由基(ABTS)的清除能力明顯比脂溶性自由基(DPPH)好。
　　探討桑黃多糖及桑黃的甲醇、乙酸乙酯、正丁醇和石油醚提取物對(duì)病原菌抑制作用，提高桑黃的利用率。從桑黃的乙酸乙酯提取物中提取的咖啡酸，將咖啡酸經(jīng)生物轉(zhuǎn)化或合成的咖啡酸烷基酯。瓊脂平板擴(kuò)散法檢測(cè)對(duì)青枯菌，桑丁香假單胞菌，大腸桿菌，蘇云金芽胞桿菌，枯草芽孢桿菌，四聯(lián)球菌和桑黃的抑制活性。結(jié)果顯

6、示，咖啡酸甲酯，咖啡酸乙酯，咖啡酸丙酯和咖啡酸異丙酯對(duì)各菌株幾乎無抑制作用；咖啡酸丁酯、咖啡酸戊酯、咖啡酸異戊酯、咖啡酸己酯和咖啡酸苯乙酯對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株具有較強(qiáng)的抑制作用；咖啡酸烷基酯對(duì)桑黃都有一定的抑制作用。分光光度法檢測(cè)有抑制作用的咖啡酸烷基酯對(duì)各菌株的抑制率。咖啡酸烷基酯對(duì)菌株的MIC50和MIC90通過SPSS分析獲得。結(jié)果表明咖啡酸烷基酯對(duì)實(shí)驗(yàn)的革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌和真菌具有較強(qiáng)的抑制作用。因此，咖啡酸烷基酯是一種新穎的有潛